柽柳Lea及MnSOD基因的抗逆功能研究

来源 :东北林业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lcyR87777
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
Lea和MnSOD都是重要抗逆基因,为了研究来自于柽柳的Lea和MnSOD基因的功能,我们分别用了酵母表达和植物转基因方法对柽柳Lea(DQ663481)和MnSOD(AY573576)基因的抗逆能力进行了研究。将从抗旱、耐盐植物-柽柳(Tamarix androssowii)中克隆得到的Lea基因与酵母表达载体pYES2连接,进行酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)的转化。对转Lea基因酵母与对照(转化空pYES2载体的酵母)经半乳糖诱导后进行Northern杂交,结果表明柽柳Lea基因在酵母中成功表达,最大表达量出现在诱导后12 h。各种非生物逆境胁迫试验表明,转Lea基因酵母具有优良的抗高温、低温、NaCl、Na2CO3、NaHCO3、旱(山梨醇)、紫外线等能力。以往研究表明Lea基因具有抗旱、耐盐及低温胁迫的能力。本研究发现Lea基因不仅具有以往研究发现的抗旱、耐盐及低温胁迫的能力,还具有抗热、耐盐碱和抗紫外辐射等能力,加深了对Lea基因功能的认识。从而为该基因转入植物中,培育具有多重抗逆能力的转基因植物提供理论和物质基础。将柽柳MnSOD基因构建到植物表达载体pROKⅡ中,利用农杆菌介导法进行山新杨(Populus davidiana×p.bolleana)的遗传转化,对长势良好的8个转化株系进行PCR和Southern斑点检测,证明MnSOD基因已整合到山新杨基因组中。Northern杂交分析表明转入的MnSOD基因已经在转基因植株中成功表达,但在不同转基因株系中的表达水平不同,其中S9和S11表达量最高。对5个转基因山新杨株系进行了盐胁迫处理。分析了转基因山新杨的耐盐能力,结果显示:在NaCl浓度为0.8%时,各转基因山新杨大部分生长良好,生根率在40%以上,平均增重319~614 mg(30 d),而对照(非转基因)山新杨不能生根;平均增重只有31.3 mg。结果表明,转基因山新杨的耐盐性得到明显提高。对转基因株系和对照株系在NaCl胁迫前后SOD活性的变化进行了分析。结果显示:NaCl胁迫前后,转基因山新杨SOD活性均高于对照。NaCl胁迫后,各转基因山新杨株系和对照的SOD活性均呈明显上升趋势,但各转基因株系的SOD活性上升的幅度显著高于非转基因山新杨,非转基因山新杨SOD活性上升了18.5%,而各转基因株系的SOD活性则上升了19.4%~51.5%。说明MnSOD基因的转入提高了植物体内SOD活性。对转基因株系和对照植株在NaCl胁迫前后的相对电导率和MDA含量进行了比较分析。结果显示:各株系相对电导率和MDA含量在NaCl胁迫后均呈上升趋势,但转基因株系相对电导率和MDA含量明显低于非转基因对照株系。说明转MnSOD基因山新杨细胞膜受到盐胁迫的伤害较非转基因植株轻。
其他文献
我国目前个人住房抵押制度对金融业构成短存长贷、资金短缺等根本性风险,然而它对金融业也存在一系列如信用风险、市场风险、经营风险等操作性风险.解决的关键是法制化、规范
牡丹(Paeonia suffruticosa),为世界著名的观赏花卉,其花朵硕大、色彩艳丽、芳香四溢,备受人们喜爱。本研究以牡丹叶柄诱导的愈伤组织为材料,进行了牡丹胚性愈伤组织的诱导;克隆牡丹
  本文首先回顾了高速公路景观恢复的发展历程,深入理解了高速公路景观恢复的内涵,并以恢复生态学、景观生态学和园林等学科相关理论为指导,总结出高速公路景观恢复的内容及原
Pilodyn是一种间接测定木材密度的无损检测仪器。用于活立木木材材性指标的间接快速测定。本文研究了pilodyn在我国栽植面积较广的树种上的应用效果,通过野外利用Pilodyn对活
骨髓增殖性肿瘤(MPNs)是一类造血干细胞起源的骨髓克隆性疾病,是一种恶性血液系统疾病〔1〕。2008年,WHO论述的MPNs的详细列表包括慢性粒细胞白血病(CML),真性红细胞增多症(P
本文以淮南凤台塌陷区为试验区研究对象,通过野外调查现有树种;对4个样地(潘集植被恢复区、凤台植被恢复区、凤台无植被废弃地以及凤台湿地区,以潘集植被恢复区为对照)进行土
三裂绣线菊Spiraea trilobata L.、绣线菊Spiraea salicifolia L.、毛花绣线菊Spiraea dasTantha Bge.属蔷薇科Rosaceae绣线菊属Spiraea L.,为多年生落叶灌木,其花色艳丽,繁
菊花(Chrysanthemum morifolium Ramat.),原产中国,是中国十大名花之一,同时它也是世界四大切花之首,占全球切花数量的30%。菊花脑(Chrysanthemum nankingense)为栽培菊花起