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环境温度是蛋鸡生存重要环境因素之一,低温环境对蛋鸡生产造成了严重破坏。低温环境刺激下产生冷应激,一方面造成了饲料利用效率降低,另一方面影响了蛋鸡的生产状态,但是冷应激对蛋鸡的负面作用机制尚不清楚。本文主要从低温环境对产蛋鸡体温,能量代谢指标,线粒体质子通道(avUCP、ANT)mRNA表达以及对抗氧化水平、应激指标等方面的影响来研究冷应激对于氧化损伤机制。1本试验选择40周龄、健康、体重相近、个体差异较小的海兰灰商品蛋鸡40只,平均体重为1.415Kg。随机分成8组(即Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ、Ⅷ)每组5个重复,其中Ⅰ-Ⅶ为试验组(选择Ⅰ-Ⅴ为冷应激组,Ⅵ、Ⅶ为恢复组),Ⅷ为对照组。选择试验组Ⅶ和对照组Ⅷ进行体温试验,各组预先放入到密闭室内(温度:21±2℃,相对湿度:75±4%,风速小于0.4m/s)预处理12h。试验开始时将试验组鸡只迅速转入室外,对照组Ⅷ也同时开始试验。冷应激组Ⅰ-Ⅴ按照顺序依次在室外低温刺激2h、4h、6h、8h、10h,恢复组Ⅵ、Ⅶ在冷应激10h后迅速转入到密闭室内分别恢复2h,4h。室外冷应激环境为河北省保定市,2012年1月19号河北农业大学标本园19:30到次日5:30室外环境(平均温度:-8.68±2.12℃平均相对湿度:76.05±18.59%平均风速:0.42±0.01m/s),体温测定以30分钟为周期进行翅下温度测定和直肠温度测定。测定显示冷应激环境下试验组Ⅶ较对照组Ⅷ体温(直肠温度、翅下温度)降低,而在恢复过程中试验组Ⅶ体温升高并超出对照组Ⅷ。2试验分组同试验1,对血清样品进行测定结果显示:(1)能量代谢水平:应激组V葡萄糖水平升高显著(P<0.05),乳酸水平显著降低(P<0.01),应激组Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ丙酮酸水平显著升高(P<0.05),应激组乳酸丙酮酸比值Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ显著下降(P<0.01),且恢复组Ⅵ相对于应激组Ⅴ显著升高(P<0.01)。应激组Ⅲ血清中甘油三酯水平相对于对照组Ⅷ和恢复组Ⅵ、Ⅶ显著升高,差异极显著(P<0.01);恢复组Ⅵ与应激组Ⅲ、Ⅳ相比显著降低(P<0.01)。应激组Ⅲ中游离脂肪酸水平相对于对照组以及恢复组Ⅵ、Ⅷ显著增加(P<0.05)。应激组Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组血清尿酸水平相对于对照组升高,且差异极显著(P<0.01)。(2)激素水平:与对照组Ⅷ相比应激组Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ以及恢复组Ⅵ组中血清中胰岛素水平显著升高(P<0.05),应激组Ⅰ、恢复组Ⅶ胰岛素水平与对照组差异不显著(P>0.05)。应激组Ⅳ中血清中T3水平相对与对照组Ⅷ相比显著升高(P<0.05),恢复组Ⅵ相对于应激组Ⅳ、Ⅴ血清T3水平显著下降(P<0.05)。应激组Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组中血清T4水平相对于对照组Ⅷ与恢复组Ⅶ显著升高(P<0.05)。相对于对照组Ⅷ应激组Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ,以及恢复组Ⅵ胰岛素抵抗指标HOMA-IRI水平显著升高(P<0.05)。相对应的胰岛素敏感指标ISI与对照组Ⅷ与恢复组Ⅶ相比应激组Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ以及恢复组Ⅵ显著降低(P<0.05)。3试验步骤同试验2,对胸肌和腿肌样本进行测定结果显示:在冷应激环境下应激组Ⅴ,恢复组Ⅵ、Ⅶ相对于对照组Ⅷ胸肌组织中avUCP mRNA水平显著升高(P<0.05),而其他应激组相对于对照组变化不显著(P>0.05)。腿肌组织中应激组Ⅳ、Ⅴ,恢复组Ⅵ、Ⅶ相对于对照组ⅧavUCP mRNA水平显著升高(P<0.05)。胸肌组织中ANT mRNA的表达水平在试验各组间无显著性差异(P>0.05);应激组Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ及恢复组Ⅵ相对于对照组腿肌组织中ANT mRNA水平显著升高(P<0.05)。4应激试验步骤同试验2,通过对血液和组织样品进行分析结果显示:与对照组Ⅷ相比应激组Ⅴ和恢复组Ⅵ、Ⅶ血清中胆碱酯酶的活性显著下降(P<0.05)。与对照组Ⅷ相比应激组中Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ肌酸激酶的活性显著升高(P<0.05),恢复组Ⅶ中肌酸激酶活性相对于其他组升高显著(P<0.05)。冷应激过程和恢复过程对乳酸脱氢酶和γ-谷氨酸转肽酶活性影响不明显(P>0.05)。低温环境下,相对于对照组Ⅷ和恢复组Ⅶ应激组Ⅱ肝脏GSH-PX水平显著升高(P<0.05)。应激组Ⅴ、Ⅵ组肝脏中T-SOD酶活性相对于对照组Ⅷ和应激组Ⅰ组显著升高(P<0.05)。应激过程和恢复过程肝脏组织中T-AOC、MDA水平变化不显著(P>0.05)。与对照组Ⅷ相比,恢复组Ⅵ肾脏中T-AOC显著升高(P<0.05),而应激组间T-AOC变化不明显(P>0.05)。与对照组相Ⅷ应激组Ⅰ恢复组Ⅶ相比,恢复组ⅥT-SOD活性升高显著升高(P<0.05)。样品中GSH-PX活性以及MDA含量变化不显著(P>0.05)。应激组Ⅳ胰腺T-AOC水平相对于应激组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ以及恢复组Ⅵ、Ⅶ显著升高(P<0.05),恢复组Ⅵ相对于应激组Ⅳ、Ⅴ显著降低(P<0.05)。应激组Ⅱ、Ⅲ以及恢复组胰脏中GSH-PX相对于应激组Ⅰ显著下降(P<0.05)。相对于对照组Ⅷ以及应激组Ⅲ应激组ⅠMDA含量较高,且差异显著(P<0.05)。在试验过程中胰脏中T-SOD活性变化不显著(P>0.05)。相对于对照组Ⅷ,骨骼肌中应激组Ⅲ、Ⅴ、Ⅵ中T-AOC显著升高(P<0.05)。应激组Ⅳ、Ⅴ以及恢复组Ⅵ、Ⅶ中GSH-PX含量相对于应激组Ⅱ降低,且差异显著(P<0.05)。应激组ⅡGSH-PX活性相对于对照组Ⅷ升高(P<0.05)。应激组Ⅳ相对于应激组Ⅰ肌肉组织中T-SOD活性显著升高(P<0.05);与应激组Ⅳ相比,应激组Ⅴ以及恢复组Ⅵ、Ⅶ总T-SOD活性显著降低(P<0.05);与对照组Ⅷ相比恢复组ⅦT-SOD活性显著降低。相对于对照组Ⅷ应激组Ⅰ,恢复组Ⅵ、Ⅶ中MDA含量显著降低(P<0.05)。