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目的 VEGF-D是一种淋巴管生长因子,能够诱导淋巴管生长并促进肿瘤淋巴道转移。本实验拟用VEGF-D基因转染Lewis肺癌细胞,并以筛选得到的高表达VEGF-D基因的肿瘤细胞接种动物,建立一种高转移和早期转移的小鼠淋巴结转移动物模型。方法 以RT-PCR从小鼠胚胎组织中扩增VEGF-D基因,经U-A克隆、酶切鉴定及测序得到完整的序列后,亚克隆并构建pcDNA3.1(+)真核表达质粒;以含有VEGF-D基因的真核表达质粒转染Lewis肺癌细胞,通过体外G418抗生素筛选得到高表达VEGF-D的肿瘤细胞克隆;用这种高表达VEGF-D的肿瘤细胞分别接种于小鼠后肢肌肉、皮下和足垫,观察肿瘤淋巴道转移的情况。结果 酶切鉴定及测序证实扩增的VEGF-D序列与Gene bank中报道的序列完全相同。用构建的真核表达质粒转染Lewis肺癌细胞,体外经G418筛选、RT-PCR和western blot分析得到高表达VEGF-D基因的肿瘤细胞克隆。以高表达VEGF-D的肿瘤细胞接种小鼠,动物实验结果显示,与对照组相比,转染VEGF-D基因的肿瘤细胞生长显著加快,肿瘤组织中血管和淋巴管明显增生,肿瘤在早期就会发生转移,且淋巴结转移率显著高于对照组。结论 VEGF-D能够诱导肿瘤内淋巴管生长以及促进