乳腺癌是妇女的一种常见恶性肿瘤，目前采用手术治疗为主的综合治疗。70年代始，术前化疗在乳腺癌的应用，使肿瘤原发灶减小，并能杀灭转移灶肿瘤细胞，提高了乳腺癌患者的生存率。 国外在乳腺癌术前化疗中，一般给予3—6个疗程，并于末次化疗结束后3周内给予手术治疗。我院对较早期乳腺癌（大多数为Ⅱ期）采用术前2天左右给予一次化疗，以CMF和CAF方案为主，这为我们提供了一个研究化疗药物抗肿瘤作用的相对早期体内模型。术后的肿瘤组织病理学观察表明：大多数肿瘤细胞表现为细胞体积增大、胞浆淡染，细胞核肿胀、核仁明显等改变，其本质是变性。部分区域也观察到了肿瘤细胞的坏死。然而，伴随乳腺癌这种术前化疗后的病理形态学改变，其分子机制以及对化疗敏感性的预示作用，尚不十分清楚。 端粒酶是近年研究中的一项新的肿瘤标志物，许多作者提出可以将其作为治疗作用靶。一些体外研究发现化疗药物可能可以抑制端粒酶活性：5—Fu可以抑制乳腺癌细胞株MCF—7端粒酶活性；顺铂可以抑制肝癌、睾丸癌等细胞株的端粒酶活性等。而另一些研究发现对表达端粒酶活性的肿瘤而言，检测到端粒酶活性是肿瘤细胞存活的标志，可以把端粒酶应用于体外化疗敏感性研究。他们发现在每次检测不超过1000个肿瘤细胞的范围内，检测到的端粒酶活性与化疗药物处理后残留的存活肿瘤细胞数的对数值成正比。因此，他们提出可以通过体外检测端粒酶活性的下降来反映化疗药物的杀伤效率。 浙江大学硕士研究生论文 尸53基因是一个重要的抑癌基因。它不仅与＊＊A复制、修复有关，还 与正常细胞的凋亡有关。尸53基因的突变则与肿瘤发生以及化疗耐药有关。 近年研究认为，化疗药物抗肿瘤的部分作用机制是诱导肿瘤细胞凋亡，而bCI 一2基因则是一个重要的抗凋亡基因。 研究目的 研究术前化疗后乳腺癌组织病理形态学改变及其分子机制。 材料和方法 本研究收集1998—2001年间共113例原发性乳腺癌，化疗 组 52例，未化疗组 61例，应用卯兔疫组化法检测 P53蛋白和 BCI—2 蛋白的表达。另收集了2000—2001年新鲜乳腺癌病例50例（包括化疗 组20例），应用宝灵曼公司TRAP—PCR—ELISA试剂盒及聚丙烯酚胺凝 胶电泳－银染法，分别进行端粒酶活性定量和定性检测。应用光学显微 镜，对术前化疗后的病理形态进行半定量研究，并与前述分子标记进行 相关性研究。 结果 1．术前化疗可以使乳腺癌细胞发生体积增大，胞浆肿胀、空泡化，细胞核 也肿胀、核仁明显等本质是变性的表现，部分细胞出现核碎裂，核溶解， 或核固缩、染色加深等坏死细胞表现。化疗组形态学改变I级17 例 （32．7％），11级15例（28．S％），Ill级20例（3S．5％）。而未化疗组形态 学表现均为1级；2，术前化疗组P53蛋白表达（57．7％）高于与未化疗组（37．7％），差别有统计 意义（X’d。50，P＝0．034）；3．术前化疗组p53 蛋白表达与乳腺癌细胞形态学改变程度呈负相关（。＝－ 0 398 Pd 001）；4．术前化疗组B。12蛋白（50．0％）表达低于未化疗组（72．1％），差别有统计 意义（X‘＝5 83，P＝0 016）；5．术前化疗组h－2蛋白表达与乳腺癌细胞形态学改变没有统计学相关性 2 浙江大学硕土研究主论文 （r＝0 046， P＝＝0 7I0）；6．术前化疗组端粒酶活性（1．09士 1．05）与未化疗组（0．88士 0．80杆B比，没 有统计学差异（t＝0．805， P＝0．425）；7．术前化疗组端粒酶活性与不同程度形态学改变没有统计学关系（HO．23， poo．797）。结 论1．乳腺癌组织病理形态改变＊级以上可能可以作为评价术前化疗疗效的指标 之一；2．术前化疗组乳腺癌细胞P53 蛋白高表达，可能与化疗药物对乳腺癌细胞 DNA的损伤有关；3．乳腺癌细胞P53 蛋白的表达与组织病理形态改变负相关，这可能与乳腺 癌细胞对化疗药物敏感性低有关；4．术前化疗组乳腺癌细胞Be12蛋白低表达，可能与化疗药物诱导肿瘤细胞 发生凋亡的机制有关；5．乳腺癌细胞端粒酶活性可能可以作为其存活的标志。