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目的： 近年来，上皮间质转化(epithelial mesenchymal transition，EMT)在肝纤维化过程中的重要作用己逐渐被证实。众多研究显示Rac1在多种细胞内具有调节肌动蛋白细胞骨架重组，导致细胞板状伪足形成和膜褶皱状运动，促进细胞运动和迁移，抑制细胞凋亡等作用。转化生长因子-β1（Transforming growth factor-β1，TGF-β1）在诱导肝细胞EMT中也起到关键的作用。但是，Rac1对肝上皮细胞中TGF-β1诱导的EMT的作用尚不清楚。本文将研究Rac1在TGF-β1诱导的LO2细胞上皮间质转化中的作用，及其对细胞增殖和凋亡的影响，以进一步探讨Rac1在肝纤维化发生和发展中的作用。 方法： 1、采用脂质体法将含有Rac1基因的四组质粒pExRed-NLS Flag（空载体组）、pExRed-NLS Flag Rac1（野生型Rac1组）、pExRed-NLS Flag Rac1T17N（显性负调控Rac1组）、pExRed-NLS Flag Rac1G12V（持续活化型Rac1组）分别转染入肝上皮细胞LO2中并用5 ng/ml TGF-β1处理48 h。 2、免疫印迹法检测转染后融合蛋白Flag-Rac1的表达。 3、采用免疫荧光法检测转染48h后上皮标志物CK8和间质标志物vimentin的表达情况。 4、采用免疫印迹法观察转染48h后上皮标志物CK8和间质标志物vimentin的表达情况。 5、采用细胞划痕实验和Transwell小室检测转染后各组细胞的迁移能力。 6、采用CCK-8法测定不同浓度NSC23766处理的LO2细胞的增殖情况。 7、采用AnnexinⅤ-FITC/PI双染法检测不同浓度NSC23766处理后的LO2细胞的凋亡。 结果： 四组质粒均瞬时转染到LO2细胞中。同空载体组和野生型Rac1组相比，持续活化型Rac1组的vimentin蛋白表达水平显著增高，CK8蛋白表达水平显著降低;而同空载体组和野生型Rac1组相比，显性负调控Rac1组vimen血蛋白表达水平降低，CK8蛋白表达水平显著增高(P＜0.05)。细胞划痕实验及Transwell法显示同空载体组和野生型Rac1组相比，持续激活型Rac1组细胞迁移能力增加，显性负调控Rac1组细胞迁移能力降低，差异有统计学意义(P＜0.05)。NSC23766处理LO2后，细胞增殖被抑制(P＜0.05)，而各处理组细胞凋亡无明显差异(P＞0.05)。 结论： 本研究证实Rac1可促进TGF-β1诱导的LO2肝细胞株上皮间质转化和细胞增殖，但对细胞凋亡无明显影响。