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目的:通过观察和胃理气方对肝郁型功能性消化不良大鼠胃肠动力及脑内相关因子下丘脑脑源性神经营养因子BDNF、海马体中环磷腺苷效应元件结合蛋白CREB以及下丘脑中大鼠β钙调蛋白激酶IIβCaMKII相对表达的影响,从脑-肠轴方面来探讨和胃理气方治疗肝郁型功能性消化不良可能的一系列理论机制。材料和方法:将40只Wistar健康的SPF级大鼠(雌雄各半)逐一称量体重并随机将其分成四组,分别为空白对照组、模型对照组、和胃理气方组和吗丁啉组。适应性喂养7天,然后逐一对其行旷场试验和蔗糖偏好实验测定。将空白对照组中的10只大鼠全部远离造模环境进行常规状态下的饲养,其余三组大鼠以采用改良式慢性不可预见性温和性应激(CUMS)方法来建立肝郁型功能性消化不良的大鼠模型,共计21天。刺激期间观察并记下各组大鼠的一般情况如大鼠的精神状态、体重、毛发色泽、耳廓红润程度、活跃程度、饮食与水量、排便次数、干稀程度等。刺激结束后逐一测量所有大鼠体重,并在特定时间和特定环境下进行旷场实验和蔗糖偏好实验,以观察并比较大鼠一般状态。治疗时,空白对照组与模型对照组在原有的特定环境下正常饲养;和胃理气组给予浓度为0.9702g/ml和胃理气方(党参片20g、柴胡15g、枳实12g、厚朴12g、木香6g、陈皮12g、白豆蔻9g、甘草片12g)溶液灌服治疗;吗丁啉组给予充分研磨后的浓度为0.297mg/ml吗丁啉悬浊水溶液进行灌服治疗。干预治疗两组大鼠应实行每日两次给药,持续时间为14天。治疗结束后同样进行大鼠体重的称量并再次进行旷场实验和蔗糖实验,比较结果。研究结束后,对所有大鼠逐一进行胃内残留率测定和小肠推进实验测定以评估其胃肠动力的功能;使用Western blot法测定大鼠下丘脑中βCaMKII以及海马体中CREB的蛋白表达,使用酶联免疫分析法测定大鼠下丘脑中BDNF含量。结果:1.一般状态及行为学检测指标结果(1)治疗前:适应性喂养一周后,造模前一天的大鼠一般状态、体质量及行为学检测指标结果无明显差异,无统计学意义(P>0.05);造模结束后,空白对照组一般情况与造模前一致,精神良好,毛发色白柔软顺滑,反应活跃,饮水和饮食状态良好,粪便干稀适中气味不大;模型对照组、和胃理气方组和吗丁啉组这三组中的大鼠精神状态极度萎靡不振,毛发枯黄不洁或伴有污秽不堪,脱毛明显增多,反应迟钝,出现厌食厌水的状态,大便稀溏,笼中臭秽,大鼠成堆撕咬或者倦卧一侧,精神极度紧张,易惊易怒,蔗糖偏好率和行为学评分都有所下降。(2)治疗后:和胃理气方组和吗丁啉组大鼠精神状态由萎靡逐渐转好,毛发逐渐变白,由枯黄逐渐变顺滑,活动度逐渐增强,饮食和饮水逐渐恢复正常,精神逐渐趋于缓和,粪质干稀适中,蔗糖偏好率和行为学评分都有所上升。2.胃内残留率和小肠推进率:与空白对照组相比,模型对照组中的大鼠胃内容物残留明显增多,小肠的推进率有明显的下降(P<0.05);与模型对照组相对比,和胃理气方组和吗丁啉组中的大鼠胃内容物残留率明显较低,小肠中的推进率明显较高(P<0.05);空白对照组、和胃理气方组与吗丁啉组大鼠胃内容物残留率和小肠推进率两两相比,其差异无统计学意义(P>0.05)。3.各组Western blot指标检测结果(1)下丘脑βCaMKII表达水平:与空白对照组相比,模型对照组中下丘脑中的βCaMKII蛋白表达水平明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。与模型对照组相比,和胃理气方组和吗丁啉组中下丘脑中的βCaMKII蛋白相对表达显著下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。与和胃理气方组相比,吗丁啉组中下丘脑中的βCaMKII蛋白表达水平稍低,差异有统计学意义(P<0.05)。空白对照组与和胃理气方组相互对比,差异无统计学差异(P>0.05)。(2)海马CREB表达水平:与空白对照组相比,模型对照组海马体组织中的CREB蛋白表达明显较低(P<0.05);与模型对照组相比,和胃理气方组与吗丁啉组中海马体组织中CREB蛋白表达显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。空白对照组、和胃理气方组与吗丁啉组中海马体CREB蛋白表达两相对比,差异无统计学意义(P>0.05)。4.酶联免疫吸附法检测下丘脑BDNF结果:与空白对照组相比,模型对照组中大鼠下丘脑BDNF含量明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);与模型对照组相比,和胃理气方组中和吗丁啉组中大鼠下丘脑BDNF含量明显上升,差异有统计学意义(P<0.05);和胃理气方组与吗丁啉组相比,和胃理气方组中大鼠下丘脑BDNF含量明显较高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:1.通过对治疗前后的大鼠重量、对蔗糖的偏好率、行为学检测评分结果的比较,表明和胃理气方能够明显地改善肝郁型功能性消化不良大鼠的一般精神状态。2.通过对比空白对照组、模型对照组、和胃理气方组、吗丁啉组大鼠胃内容物残留率以及小肠推进率,和胃理气方组和吗丁啉组大鼠胃内容物残留率均低于模型对照组,小肠的推进率均高于模型对照组,且逐渐趋于空白对照组;和胃理气方组与吗丁啉组大鼠胃内容物残留率和小肠的推进率相比,差异无统计学意义,表明和胃理气方与吗丁啉均能显著推进胃肠蠕动,能够有效的改善功能性消化不良模型大鼠的一系列消化道症状。3.通过对肝郁型功能性消化不良模型大鼠下丘脑中BDNF、海马体中CREB以及下丘脑中βCaMKII等指标的检测,发现同空白对照组相比,模型对照组中大鼠下丘脑中的BDNF含量明显下降,海马中的CREB表达水平明显下降,下丘脑中的βCaMKII表达水平明显升高。研究表明,和胃理气方和吗丁啉的干预治疗均对下丘脑中BDNF、海马中CREB和下丘脑中βCaMKII有良性的调节作用,说明和胃理气方不仅能够有效地促进胃动力来缓解功能性消化不良的胃肠状态,而且能够通过有效地缓解大鼠抑郁状态来治疗肝郁型功能性消化不良的一般精神情志状态,从两方面来全面治疗本疾病,具有良好的优势。