苦参碱对人横纹肌肉瘤RD细胞的作用及对ERK/MAPK通路的影响

来源 :徐州医学院 徐州医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:cn0531
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:探讨不同浓度的苦参碱对人RMS-RD细胞的作用及其对ERK/MAPK信号传导通路的影响。  方法:取对数生长期的细胞,分为对照组(含细胞无Ma)及药物干预组:苦参碱组:苦参碱终浓度分别为0.5,1.0,1.5,2.0(单位为mg/ml);U0126组:U0126为10μM;苦参碱联合U0126共同作用组:U012610/μM+Ma0.5 mg/ml,U012610 gM+Mal.0 mg/ml,U012610μM+Mal.5 mg/ml,U012610μM+Ma2.0 mg/ml;每组5个复孔。应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测RMS-RD细胞的增殖抑制率;流式细胞仪(FCM)检测凋亡率;选取对照组及药物干预组中的三组(U012610μM,苦参碱1.0mg/ml,U012610μM+苦参碱1.0mg/ml),运用WesternB10t方法检测ERK1/2,p-ERK1/2及RT-PCR方法检测ERKmRNA的表达。最后采用SPSS16.0统计软件进行单因素方差分析,P<0.05为差异有统计学意义。  结果:MTT比色法检测对照组及各浓度组存活率(%)分别为13.39±1.13、23.49±0.39、38.84±0.35、48.05±0.82、63.47±1_35、13.91±0.63、24.52±0.46、39.82±0.58、48.98±0.31和65.09±0.85;流式细胞仪检测对照组及各浓度组凋亡率(%)分别为5.49±0.96、14.23±0.70、25.84±4.17、36.08±3.68、42.53±2.71、6.72±1.52、17.23±3.42、27.83±1.29、38.25±1.44和47.79±1.35;除U0126浓度组外,其余各组存活率及凋亡率与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。WesternBlot方法检测各组ERK1/2、P-ERK1/2的表达水平显示:与对照组比较,苦参碱组及苦参碱+U0126组ERK、p-ERK1/2的表达量有明显降低(P<0.01),U0126组ERK蛋白表达量与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),p-ERK1/2蛋白表达量与对照组比较存在差异,有统计学意义(P<0.05);与U0126比较,苦参碱组及苦参碱+U0126组ERK表达量降低(P<0.05),p-ERK1/2表达量无统计学意义(P>0.05)。RT-PCR方法检测ERKmRNA的表达水平显示:苦参碱组及苦参碱+U0126组ERKmRNA的表达量与对照组比较有明显降低,具有统计学意义(P<0.01),U0126作用组ERKmRNA的表达量与对照组比较无统计学意义(P>0.05);与U0126组比较,U0126+苦参碱组ERKmRNA的表达量明显降低(P<0.05)。  结论:苦参碱作用于RD细胞,表现出抑制该细胞的增殖,促进其凋亡,在本实验范围内浓度越高这种抑制增殖、诱导凋亡作用越明显。同时可抑制ERKmRNA的表达及ERK1/2蛋白磷酸化的活性。
其他文献
染色体非整倍体异常尤其是21-三体异常一直是产前筛查的重点,该病在活产儿中的发病率为1/800~1/600,至今缺乏对该病有效的治疗手段,唯一有效可行的措施是施行产前筛查,及早发现高
目的:研究新西兰大白兔自体血栓性脑梗塞模型超急性期的磁共振(magneticresonance imaging,MRI)表现及尿激酶(urokinase,UK)治疗前增强MR检查对治疗后出血性转化(hemorrhagic tr
目的:分水岭脑梗死(cerebral watershed infarction,CWI)是指发生在2条或3条脑动脉末梢交接区脑梗死,大约占缺血性脑卒中的10%。以往对于多次CWI发作特点的研究未得到足够的重视,
《普通高中思想政治课程标准(17版)》指出,学科核心素养由政治认同、科学精神、法制意识以及公共参与组成,特别是推动核心素养目标的过程中注重“学生主动参与”.案例式教学