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目的:探讨不同浓度的苦参碱对人RMS-RD细胞的作用及其对ERK/MAPK信号传导通路的影响。 方法:取对数生长期的细胞,分为对照组(含细胞无Ma)及药物干预组:苦参碱组:苦参碱终浓度分别为0.5,1.0,1.5,2.0(单位为mg/ml);U0126组:U0126为10μM;苦参碱联合U0126共同作用组:U012610/μM+Ma0.5 mg/ml,U012610 gM+Mal.0 mg/ml,U012610μM+Mal.5 mg/ml,U012610μM+Ma2.0 mg/ml;每组5个复孔。应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测RMS-RD细胞的增殖抑制率;流式细胞仪(FCM)检测凋亡率;选取对照组及药物干预组中的三组(U012610μM,苦参碱1.0mg/ml,U012610μM+苦参碱1.0mg/ml),运用WesternB10t方法检测ERK1/2,p-ERK1/2及RT-PCR方法检测ERKmRNA的表达。最后采用SPSS16.0统计软件进行单因素方差分析,P<0.05为差异有统计学意义。 结果:MTT比色法检测对照组及各浓度组存活率(%)分别为13.39±1.13、23.49±0.39、38.84±0.35、48.05±0.82、63.47±1_35、13.91±0.63、24.52±0.46、39.82±0.58、48.98±0.31和65.09±0.85;流式细胞仪检测对照组及各浓度组凋亡率(%)分别为5.49±0.96、14.23±0.70、25.84±4.17、36.08±3.68、42.53±2.71、6.72±1.52、17.23±3.42、27.83±1.29、38.25±1.44和47.79±1.35;除U0126浓度组外,其余各组存活率及凋亡率与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。WesternBlot方法检测各组ERK1/2、P-ERK1/2的表达水平显示:与对照组比较,苦参碱组及苦参碱+U0126组ERK、p-ERK1/2的表达量有明显降低(P<0.01),U0126组ERK蛋白表达量与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),p-ERK1/2蛋白表达量与对照组比较存在差异,有统计学意义(P<0.05);与U0126比较,苦参碱组及苦参碱+U0126组ERK表达量降低(P<0.05),p-ERK1/2表达量无统计学意义(P>0.05)。RT-PCR方法检测ERKmRNA的表达水平显示:苦参碱组及苦参碱+U0126组ERKmRNA的表达量与对照组比较有明显降低,具有统计学意义(P<0.01),U0126作用组ERKmRNA的表达量与对照组比较无统计学意义(P>0.05);与U0126组比较,U0126+苦参碱组ERKmRNA的表达量明显降低(P<0.05)。 结论:苦参碱作用于RD细胞,表现出抑制该细胞的增殖,促进其凋亡,在本实验范围内浓度越高这种抑制增殖、诱导凋亡作用越明显。同时可抑制ERKmRNA的表达及ERK1/2蛋白磷酸化的活性。