肿痛熏洗液对肛肠病术后疼痛模型大鼠NF-κB p65及相关炎症因子影响的实验研究

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目的:探讨肿痛熏洗液对肛肠病术后疼痛模型大鼠肛门直肠组织NF-κB p65蛋白表达水平及血清白细胞介素-6(IL-6)、环氧化酶-2(COX-2)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量水平的影响,从分子生物学水平研究肿痛熏洗液用于肛肠病术后抗炎镇痛的机制。方法:将42只健康清洁级SD雄性大鼠随机分为6组,每组7只,分别为空白对照组(正常组)、模型组、生理盐水组、马应龙麝香痔疮膏组(痔疮膏组)、肿痛熏洗液组(熏洗液组)、肿痛熏洗液联合马应龙麝香痔疮膏组(联合用药组),除正常组外均建立肛肠病术后疼痛模型,联合用药组及熏洗液组均用肿痛熏洗液熏洗肛门直肠创面,生理盐水组用等量生理盐水熏洗,联合用药组及痔疮膏组均用马应龙麝香痔疮膏局部涂抹创面(以上各组用药均为每日2次,连续用药3天),模型组及正常组均不予治疗。3天后心脏采血保存,用酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定各组大鼠血清中IL-6、COX-2、TNF-α含量;取肛门-直肠组织放入多聚甲醛标本固定液固定,常规石蜡切片,行NF-κB p65蛋白的免疫组化染色,Image J软件对免疫组化图片的平均光密度进行定量。结果:模型组大鼠血清IL-6、COX-2、TNF-α含量及肛门直肠组织NF-κB p65蛋白表达水平均高于正常组(P<0.05)。治疗3天后,生理盐水组IL-6、COX-2、TNF-α含量及肛门直肠组织NF-κB p65蛋白表达水平与模型组相比无差异(P>0.05);联合用药组、熏洗液组、疮膏组血清IL-6、COX-2、TNF-α含量及肛门直肠组织NF-κB p65蛋白表达水平均低于模型组及生理盐水组(P<0.05);联合用药组下调血清IL-6、COX-2、TNF-α含量及肛门直肠组织NF-κB p65蛋白表达水平均优于熏洗液组及痔疮膏组(P<0.05);熏洗液组下调血清IL-6、TNF-α含量及肛门直肠组织NF-κB p65蛋白表达水平优于痔疮膏组(P<0.05)。结论:肿痛熏洗液可以通过抑制肛肠病术后疼痛模型大鼠NF-κB信号通路活化,降低肛门直肠组织中NF-κB p65含量,下调血清IL-6、COX-2、TNF-α含量,且联合马应龙麝香痔疮膏局部用药效果更佳。这可能与肿痛熏洗液减轻肛肠病术后局部炎症反应从而达到消肿止痛的作用有关。
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