【摘 要】
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本研究采用体外培养法,以苜蓿为底物,收集3头装有永久性瘤胃瘘管的中国荷斯坦奶牛的瘤胃液,采用单因素试验设计,即在苜蓿底物的基础上添加不同浓度的琥珀酸（0 mmol/L、4mmol/L、8 mmol/L、12 mmol/L）,研究琥珀酸对瘤胃产气参数、瘤胃发酵的影响;基于16S rRNA基因高通量测序分析技术,研究瘤胃细菌菌群组成的变化;并进一步以靶向能量代谢定量分析,检测了参与瘤胃丙酸生成过程中重
【基金项目】
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国家自然科学基金，项目编号:32160797《日粮琥珀酸调控滩羊瘤胃菌群代谢及肉质性状的作用与机制》
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本研究采用体外培养法,以苜蓿为底物,收集3头装有永久性瘤胃瘘管的中国荷斯坦奶牛的瘤胃液,采用单因素试验设计,即在苜蓿底物的基础上添加不同浓度的琥珀酸（0 mmol/L、4mmol/L、8 mmol/L、12 mmol/L）,研究琥珀酸对瘤胃产气参数、瘤胃发酵的影响;基于16S rRNA基因高通量测序分析技术,研究瘤胃细菌菌群组成的变化;并进一步以靶向能量代谢定量分析,检测了参与瘤胃丙酸生成过程中重要中间产物含量的变化,初步探讨琥珀酸影响丙酸生成的机理。试验一:琥珀酸对体外瘤胃发酵的影响。结果表明,随着琥珀酸浓度的增加,24 h产气量、潜在产气量呈线性和二次变化（P＜0.05）,缓慢产气量呈二次变化（P＜0.05）,均在琥珀酸浓度为8 mmol/L时最高。快速产气量、乙酸、丙酸、丁酸和总挥发性脂肪酸浓度随着琥珀酸添加量的增加呈线性或线性和二次增加（P＜0.05）,而乙酸/丙酸的变化规律与丙酸恰恰相反。试验二:琥珀酸对体外瘤胃细菌菌群结构的影响。结果表明,琥珀酸的添加改变了细菌菌群的组成。在门水平上,随着琥珀酸浓度的增加,厚壁菌门、软壁菌门、纤维杆菌门和绿菌门的相对丰度呈线性增加（P＜0.05）,放线菌门、蓝藻菌门的相对丰度呈线性和二次降低（P＜0.05）。在属水平上,随着琥珀酸浓度的增加,解琥珀酸菌属、弯曲杆菌属、月形单胞菌属、丁酸弧菌属、厌氧支原体属、假丁酸弧菌属、脱硫弧菌属、纤维杆菌属的相对丰度随着琥珀酸浓度的增加线性增加（P＜0.05）,而棒状杆菌属的相对丰度呈线性和二次降低（P＜0.05）。月形单胞菌属、厌氧支原体属、假丁酸弧菌属相对丰度与丙酸浓度显著正相关（P＜0.05）。试验三:琥珀酸对体外瘤胃微生物能量代谢组的影响。结果表明,添加琥珀酸显著改变了体外瘤胃微生物30种能量代谢物,其中显著降低了丙酮酸、草酰乙酸、苹果酸、琥珀酸、琥珀酰辅酶A的含量,这些代谢物与丙酸生成相关菌属存在联系。显著影响了柠檬酸循环、糖酵解/糖异生、乙醛酸和二羧酸代谢、丙酮酸代谢、淀粉和蔗糖代谢、丙酸代谢等代谢途径（P＜0.05）。综上所述,添加琥珀酸通过促进丙酸生成菌的增殖,影响了瘤胃微生物丙酸生成相关途径,进而促进了丙酸的生成。
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