尿源性脓毒血症兔模型的制备及乌司他丁的治疗作用

来源 :南华大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:lzl2008000
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目的将脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)注入输尿管内并结扎该侧输尿管建立尿源性脓毒血症的兔模型;探讨乌司他丁对脓毒血症的疗效,为乌司他丁治疗尿源性脓毒血症提供理论和实际依据。方法1、选择结扎家兔左侧输尿管,左侧输尿管内注入脂多糖,建立尿路梗阻及泌尿系感染并脓毒症的动物模型。2、将24只健康雄性家兔随机分成四组,每组6只。正常组(Xormal组),假手术组(Sham组),模型组(Model组)和治疗组(UTI组)。3、造模36h后监测各组实验家兔体温,呼吸频率,检测外周血细胞计数、血清C反应蛋白;采用ELISA法测定血清TNF-α、IL-10的含量;各组肝、肾、肺组织行HE染色,光学显微镜下观察各组织的形态结构变化;免疫组织化学检测各组家兔肾组织的TNF-α、IL-10蛋白的表达水平。结里1、家兔的一般情况实验家兔假手术组与正常组体温,呼吸频率变化不明显,无统计学意义(P>0.05);模型组明显高于正常组及假手术组(P<0.05),乌司他丁组低于模型组(P<0.05)。2、血液检测指标血细胞WBC计数结果:实验家兔正常组与假手术组比较,差别无统计学意义(P>0.05);模型组明显高于正常组及假手术组(P<0.05),治疗组有下降趋势,有统计学意义(P<0.05)。各组血细胞计数(PLT)结果,差异无统计学意义(P>().05)。血清C-反应蛋白(CRP)结果:实验家兔假手术组有升高趋势,与正常组比较差异有统计学意义(P<0.05);模型组明显升高,差别有统计学意义(P<0.05);治疗组与模型组比较明显下降,差别有统计学意义(P<0.05)。家兔血清TNF-α, IL-10含量结果:与正常组比较,假手术组家兔血清TNF-α IL-10变化无统计学意义(P<0.05);与假手术组比较,模型组明显升高(P<0.05);模型组与治疗组比较,治疗组血清TNF-α明显降低(P<0.05),血清IL-10明显升高(P<0.05)。3、肝,肾,肺HE染色实验家兔正常组和假手术组组织形态结构正常。模型组,肝细胞轻微肿胀,胞浆松弛,有散在炎症细胞浸润;肾小球变形,肾小管管腔变大,肾间质有炎症细胞浸润;肺泡间隔弥漫性增厚,有炎症细胞浸润。治疗组较模型组上述变化有所减轻。4. TNF-α,IL-10蛋白免疫组化家兔正常组、假手术组肾组织内TNF-α,IL-10蛋白主要呈微弱表达;TNF-α蛋白在模型组表达最强;IL-10蛋白在治疗组表达最强。结论1、应用内毒素(LPS)注入输尿管,并结扎该侧输尿管36小时后基本能成功复制尿源性脓毒症模型。2、乌司他丁能有效防治尿源性脓毒症,减轻组织器官的炎症反应,其机理可能是通过下调TNF-α,上调IL-10。
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