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本实验利用油平板筛选法和排油圈法,从辽河某油田土壤中分离筛选出3株.高效的生物表面活性剂产生菌,并将其分别命名为：A3、As、Y,其发酵液的表面张力值分别为35.7 mN/m、37.5 mN/m、34.7 mN/m,排油圈直径均达到了5 cm,具有良好的表面活性。通过16s rRNA基因序列分析对所筛选菌株进行分子生物学鉴定,确定其种属,并对其所产生的生物表面活性剂进行提取以进行薄层色谱分析,进而确定该生物表面活性的种类。结果表明,3株菌均为假单胞菌属(Pseudomonas sp.)。以表面张力值为考察依据,对菌株A3、As、Y及3株菌的混合菌的发酵培养条件进行了L16(45)正交优化实验,选取的因子为培养温度、培养基pH值、NaCl浓度、碳源浓度和氮源浓度。其中菌株A3的最佳发酵条件为：培养温度为30℃、pH为6.0、NaCl浓度为4g/L、葡萄糖浓度为35g/L、硝酸钠浓度为4 g/L。采用5种提取方法对优化后发酵液中的生物表面活性剂进行提取。菌株A3、As、Y和A3-As混合菌的生物表面活性剂提取量较优化前有明显的提高,其产量分别是优化前的8.4倍,6.4倍,5.6倍和5.7倍,其中,菌株As的生物表面活性剂产量最高,可达20.55g/L。对于3种纯菌和A3-As混合菌而言,5种提取方法中均以CHC13萃取的量最高；而对其他混合菌,5种提取方法的差别并不显著。菌株A3所产生物表面活性剂的临界胶束浓度值(Critical Micelle Concentration, CMC)经实验确定为200 mg/L,其CMC值较低。生物表面活性剂的稳定性是表征它优良性能的一个重要指标,因此对菌株A3所产生物表面活性剂进行了酸碱度、温度及矿化度的稳定性研究,发现温度从15.2℃～150℃,表面张力值的波动范围很小,均保持在47 mN/m左右。氯化钠浓度从0 g/L加至饱和,表面张力值基本上保持在42 mN/m左右。pH值在2.0-6.0范围内变化时,表面张力值从31 mN/m升高到50mN/m,在pH6.0-pH13.0范围内,表面张力值保持在50 mN/m左右。可见菌株A3所产生物表面活性剂在极端的环境下仍能保持优良的生物活性,为其在实际环境中的应用奠定了基础。蒽的生物降解实验包括：乳白耙齿菌F17对蒽降解情况的探究,生物表面活性剂的添加浓度、投加时间、降解体系的温度、酸碱度对蒽降解的影响；木屑的加入对蒽降解效果的影响；蒽降解过程中乳白耙齿菌F17分泌的胞外酶活性的变化。结果表明,在不投加生物表面活性剂时,乳白耙齿菌F17对蒽的降解率在15 d后可达到59.0%；而生物表面活性剂的加入则能显著提高蒽的降解率,并且在100～1000 mg/L的范围内,随着生物表面活性剂投加量的增加,降解率也随之明显增大,第15d蒽的降解率达到了93.3%。生物表面活性剂的投加时间、降解体系的温度、酸碱度及木屑对蒽的降解效果都有一定的影响,生物表面活性剂在乳白耙齿菌F17前1 d加入培养基中,能促进蒽的溶解,有利于乳白耙齿菌F17对蒽的利用,提高降解率。酸碱度对微生物的生长有较大影响,pH值在5.0时乳白耙齿菌F17对蒽的降解效果最好。温度对蒽的降解也有一定的影响,28℃-30℃是乳白耙齿菌F17降解蒽的最适温度范围。在培养基中加入木屑对乳白耙齿菌F17合成降解酶有诱导作用,从而提高了该菌对葸的降解率。乳白耙齿菌F17分泌的锰过氧化物酶(MnP)、木质素过氧化物酶(LiP)和漆酶(Lac)在降解过程中都能检测到,但在蒽的生物降解过程中,漆酶和木质素过氧化物酶可能起了主要作用。本研究结果为高效产生物表面活性剂的合成提供了新的菌源,也为生物表面活性剂产量的提高及其高效提取提供了适宜的方法。其优良的表面活性稳定性推动了生物表面活性剂应用领域的拓展,能够为新型生物表面活性剂的开发及其应用奠定基础。