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目的:研究激素对于中等量蛋白尿FSGS患者的疗效;初步探讨自噬在COL4A3基因突变相关肾病发病机制中的作用;评估MCP-1作为尿液分子标志物在COL4A3相关肾病及FSGS患者临床预后中的潜在价值。方法:第一部分纳入2006年至2016年在我科就诊,临床和病理确诊为原发性FSGS,且至少2次尿蛋白在1.0-3.5g/24h之间,血白蛋白>30g/L,GFR>30ml/min的患者分别接受激素(0.4-0.6mg/kg)联合ACEI/ARB类药物(治疗组)或单用ACEI/ARB类药物治疗(对照组),定期随访患者临床症状和体征、血压、血尿常规、血糖、血白蛋白、24h尿蛋白定量、肝肾功能及血脂等实验室指标。比较两组患者缓解率、蛋白尿及肾功能情况,随访时间大于1年,复合终点事件为GFR<30ml/min或下降>30%。第二部分应用前期已获得的CRISPR/Cas9技术构建的Col4a3 p.Arg1631Stop小鼠模型,通过尿常规、生化检验及肾脏病理检查观察小鼠的肾脏表型,肾组织电镜下观察自噬小体,采用RT-qPCR和Westernblot研究自噬相关分子的表达情况。第三部分我们在小鼠模型中通过RT-qPCR和Westernblot研究MCP-1表达水平。ELISA方法分别检测慢病毒稳定转染的COL4A3人足细胞突变株细胞培养上清液,模型小鼠尿液,FSGS患者和健康对照组尿液中MCP-1水平。同时分析尿MCP-1水平与蛋白尿和血肌酐等临床表现的相关性。结果:第一部分共纳入102名患者(治疗组N=52,对照组N=50),中位随访时间为36(12-117)个月。随访至12个月时,激素联合ACEI/ARB治疗组的总缓解率显著高于对照组[73.1%VS 50.0%(P=0.01)],初始缓解的中位时间为3个月,而对照组为6个月。治疗组患者22.2%到达复合终点,对照组为42.0%。中位生存时间治疗组为72个月,对照组为57个月(P=0.03)。在10名患者中观察到轻微不良反应(治疗组N=8,对照组N=2)。第二部分Col4a3 p.Arg1631Stop小鼠模型中纯合组6周出现了明显的血尿和蛋白尿,伴血肌酐显著升高,28周小鼠肾脏病理光镜示局灶节段肾小球硬化,电镜示基底膜明显增厚。纯合组小鼠肾皮质组织中自噬相关蛋白LC3-I/LC3-II、Atg16L1、Beclin-1及CHOP的表达均显著上调。电镜下观察到纯合小鼠足细胞自噬体明显增多。第三部分我们发现Col4a3 p.Arg1631Stop小鼠纯合组肾皮质组织MCP-1表达显著上调。严重COL4A3p.Leu1528stop突变组的人足细胞上清液较其他组,纯合组小鼠尿液较杂合及野生组,以及FSGS患者较对照组尿液中MCP-1表达水平均明显升高。且FSGS患者血肌酐水平与尿MCP-1水平呈显著正相关(P<0.01,Pearson相关系数0.426)。提示MCP-1表达升高可能预示COL4A3相关肾病表型和FSGS患者病情相对严重。结论:中小剂量激素联合ACEI/ARB类药物治疗中等量蛋白尿FSGS患者疗效优于单用ACEI/ARB类药物,且安全性较好,无严重不良反应;携带严重突变的Col4a3p.Arg1631Stop小鼠模型纯合组肾脏病变较重,光镜病理表现为FSGS改变,过度自噬可能是其重要发病分子机制;MCP-1有望成为评估COL4A3相关肾病表型轻重和FSGS病情严重程度的一个新的分子指标。