miRNA-29a通过调控PTEN/Akt通路促进PC12细胞轴突伸长

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目的:1、研究mi R-29a对PC12细胞向神经细胞分化的影响,为进一步探究mi R-29a生物学作用奠定基础;2、探明mi R-29a调控PTEN表达,激活PTEN下游Akt通路。方法:1、以PC12细胞为研究对象,建立并筛选出高表达mi R-29a细胞株(PC12-p LKO-mi R-29a),以高表达p LKO.1-puro-vector空载的细胞(PC12-p LKO-vector)作为对照;2、通过点突变及双荧光报告基因明确mi R-29a作用于PTEN的m RNA位点;3、通过RT-PCR、细胞免疫荧光、Western blot观察mi R-29a对PC12细胞轴突的影响。结果:1、mi R-29a能够作用于PTEN的3′UTRs区,并特异性地降低PTEN的表达量;2、mi R-29a能够激活PTEN/Akt通路促进PC12细胞轴突伸长。结论:本研究初步证实mi R-29a能够促进PC12细胞分化,轴突伸长,该过程同mi R-29a抑制PTEN表达,激活Akt通路有关,能够为mi R-29a治疗神经损伤提供研究基础
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