缺血预处理对甲状旁腺缺血再灌注损伤保护作用的研究

来源 :昆明医科大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:treesoft_ng
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目的:探索术中甲状旁腺不同程度的机械性缺血是否造成缺血再灌注损伤以及缺血预处理(ischemicpreconditioning,IPC)是否对甲状旁腺缺血再灌注损伤(ischemia-reperfusioninjury,I-RI)有保护作用,进一步探明能够对甲状旁腺的缺血再灌注损伤起到保护作用的较好的预处理时间段,为甲状旁腺的保护提供新的思路和方法。方法:以实验家兔为研究对象,随机分为A、B、C(IP0.5min、IPlmin、IP3min、IP5min)、D七组,每组8只。A组(假手术组):为单纯暴露、探查甲状腺、甲状旁腺;B组(缺血再灌注损伤组):随机分为左侧缺血组和右侧缺血再灌注损伤组,分别用无创血管夹夹闭左右两侧甲状旁腺动脉5min、l0min、20min、30min后,左侧组直接取出甲状旁腺放置于10%甲醛溶液中固定,右侧组缺血相应的时间段5min、l0min、20min、30min后再灌注30min后取出甲状旁腺放置于10%甲醛溶液中固定;C组(缺血预处理组IP):随机分为四组,分别为预处理0.5min、lmin、3min、5min组。用无创血管夹同时夹闭甲状旁腺动脉0.5mmin、lmin、3min、5min,后分别恢复血流0.5min、lmin、3min、5min进行缺血预处理,反复上述操作2次后每组缺血30min后再灌注30min;D(缺血再灌注组RI):暴露甲状腺、甲状旁腺,直接用无创血管夹同时夹闭甲状旁腺动脉,缺血30min后再灌注30min。A、C、D组分别于术后1、7、14、30d切取家兔的甲状旁腺组织放置于10%甲醛溶液中,B组在实施缺血及缺血再灌注干预后,立即取出甲状旁腺放置于10%甲醛溶液中。行HE染色制作病理学切片观察甲状旁腺的存活情况及病理学改变、运用细胞凋亡原位末端标记技术(TUNEL法)检测甲状旁腺细胞凋亡数。结果:1、甲状旁腺形态学表现:机械性夹闭家兔甲状旁腺动脉相应时间段后,甲状旁腺表面颜色由鲜红逐渐变为苍白。2、病理结果:A组(假手术组):均为正常的甲状旁腺组织,以主细胞为主,未见明显出血及细胞坏死;B组(缺血再灌注损伤组):左侧缺血组表现为血管扩张充血,出血面积为20-30%;右侧缺血再灌注损伤组表现为广泛出血和局部坏死,其中缺血30min再灌注30min的右侧甲状旁腺组出血面积为40%,坏死面积为5%;C组(缺血预处理组IP):IP0.5min、IPlmin组甲状旁腺见血管充血、扩张,未见明显坏死;IP3min组,甲状旁腺见出血及淤血;IP5min组,甲状旁腺可见出血及坏死,坏死面积为20%,残存细胞增生;D组(缺血再灌注组RI):甲状旁腺广泛出血,血栓形成,坏死面积为4%~20%不等,部分细胞空泡化,少量纤维性增生。3、细胞凋亡原位末端标记技术(TUNEL法)检测甲状旁腺细胞凋亡数:对实验组间进行统计学交叉对比分析:从B组甲状旁腺细胞凋亡数可看出,在不同的缺血时间里,缺血再灌注损伤组的甲状旁腺凋亡细胞明显高于缺血组(P<0.05);对A、C、D组的实验结果进行统计分析,C组缺血预处理组中除了 IP5min组外,其余各组的凋亡细胞均明显低于D组缺血再灌注组(P<0.05);在C组缺血预处理组间交叉对比,除IP0.5min组和IPlmin组、IPlmin组和IP3min组(P>0.05),无统计学差异性以外,其余各小组对比(P<0.05),差异有统计学意义。结论:1、家兔的甲状旁腺在不同的机械性缺血时间下会造成相应程度的缺血再灌注损伤,受到缺血再灌注损伤的甲状旁腺凋亡细胞较缺血的甲状旁腺凋亡细胞多。2、缺血预处理对家兔甲状旁腺的缺血再灌注损伤有一定的保护作用,其中缺血预处理时间为0.5min和lmin是较优的预处理时间段。
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