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促雄性腺(Androgenic gland)是雄性甲壳动物特有的一种内分泌腺。该腺体与性别分化有关,几乎存在于软甲亚纲的各个目中。
本实验首先解剖分离中华绒螯蟹促雄性腺,进行蛋白质提取,然后将该蛋白提取液经过凝胶层析过滤,所得到的各个分离组分再分别进行促雄性腺素生物活性的初步检测,再结合本实验室前期结果,推测凝胶层析后所得的各组分中,有9个组分可能具有促雄性腺素生物活性,这些组分分别为3A、4A、5A、6A、7A、8A、9A、10A和11A,所对应的蛋白质浓度范围为0.011~0.051μg/μl。将这些可能具有促雄性腺素生物活性的分离组分别注射到刚刚完成性别分化的的中华绒螯蟹雌性幼蟹体内,养殖观察,发现在注射了样品3A和5A的雌性幼蟹中出现了雄性附肢,这种性别逆转的现象发生在幼蟹经处理完的首次褪壳之后,时间大约为20天,此时的成活率为17.93%,性逆转现象的发生率为5.63%,证明该样品中应该存在中华绒螯蟹促雄性腺素。每个雌性幼蟹分别注了射2.5μl样品,对3A组份而言,大致相当于注射了0.022个AG(根据蛋白质含量推算而来),而5A组份则相当于注射了0.009个AG。样品3A在SDS-PAGE上分子量范围为15.89-16.25KD处存在有一条较强的蛋白质条带,其余部分没有明显的蛋白质条带出现,初步确定该蛋白条带就是中华绒螯蟹促雄性腺素。