放疗通过miR-23a/PTEN通路促进HUVEC增殖及迁移的机制研究

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目的:研究放射治疗促进肺腺癌细胞分泌的外泌体携带microRNA-23a对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖迁移的影响及其作用机制。方法:选取HEK293细胞、肺腺癌A549、H1299细胞为外泌体来源,HUVEC作为外泌体受体细胞,实验分组为:HEK293细胞外泌体组,腺癌细胞外泌体组,腺癌细胞外泌体组(4Gy X射线),并采用microRNA inhibitor对miRNA-23a表达进行敲降。各组采用CCK8、Ki67染色等方法检测HUVEC的增殖能力;通过划痕实验及transwell小室实验比较各组HUVEC的迁移能力。采用real timePCR比较各组microRNA-23a、PTEN等分子的表达,采用Wetern Blot检测各组PT EN、磷酸化AKT (p-AKT)等分子的变化,分析其中机制。结果:本实验发现肺腺癌细胞外泌体可促进HUVEC的增殖及迁移,在肺腺癌细胞受到照射后(4Gy X射线),这种促进作用得到进一步增强。Real time PCR结果提示肺腺癌细胞照射之后,microRNA-23a的表达上调,同时其外泌体中的microRNA-23a的含量也得到上调,外泌体携带增高的microRNA-23a至HUVEC之后,抑制HUVEC中的PTEN表达,从而上调AKT的磷酸化水平(p-AKT),进而促进HUVEC增殖及迁移。结论:放射治疗促进肺腺癌细胞外泌体中microRNA-23a的表达,进而抑制HUVEC中PTEN/磷酸化AKT通路,促进血管生成。
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