自然界中,很多植物都会受到病毒侵染而引起病毒病,几乎每种农作物和经济作物都受到几种甚至十几种病毒的危害,近几年黄瓜花叶病毒、烟草花叶病毒及芜菁花叶病毒造成许多蔬菜品种减产或绝产。随着生态条件的改变和植物种质资源的引进,病毒种类有逐渐增多,危害逐渐加重的趋势。植物病毒虽是严格的细胞内寄生物,但专化性并不强,往往一种病毒可寄生在不同种、属甚至不同科的植物上,常常发生复合侵染,因此对发病植株做到早期诊断及提前检测就显得尤为重要。开发高通量、快速、灵敏、规范化的检测体系是病毒检测发展的必然方向。 本研究通过指示植物鉴定法、酶联免疫吸附法、PCR等方法对TMV,CMV,PVX,PVY,WMV,ZYMV,TuMV这七种广普性植物病毒进行了鉴定。在此基础上,建立了多重RT-PCR体系同时检测这几种病毒,再在这个体系的基础上建立了可视芯片的检测体系。并对这几种方法在病毒检测的特异性、灵敏度及快速性等方面进行了比较。结果显示,建立的可视芯片体系能够同时快速检测这七种病毒,且有很高的特异性和灵敏度。 本项目使用的这种可视芯片无需用激光共聚焦扫描仪等来检测荧光信号,用肉眼即可看到实验结果,大大节省了时间及经济成本,并且这种芯片是以PCR的产物的特异性序列来做的探针,所以它的灵敏度和重复性都相当的高。目前,还尚且没有人用这种芯片来检测植物病毒。