论文部分内容阅读
背景: 肝细胞癌(HCC)是世界上较常见且恶性程度很高的恶性肿瘤之一,其发病率和死亡率呈逐年升高的趋势,严重威胁人类的健康和生命,但其早期定性定位诊断仍然非常困难。超声造影剂及相关技术的发展使人们对超声造影在诊断肝脏肿瘤中的作用有了更进一步地了解,但目前用于肝脏肿瘤研究的超声造影剂是一种无定向选择作用的全身性造影剂。研究发现,抗人肝细胞癌单克隆抗体对肝细胞癌组织有很高的特异性,能选择性定位于癌组织。设想若以该抗体为导向载体制备靶向造影剂,则可使造影剂以更高的浓度聚集在靶组织,达到定向显影的目的。 目的: 在本科实验室研制脂质体超声造影剂“脂氟显”的基础上,引入抗人肝细胞癌单克隆抗体导向技术,制备对HCC具有特异靶向作用的免疫脂质体超声造影剂,在体外对其免疫学性质进行鉴定,并探讨该造影剂对荷人肝癌裸鼠肿瘤的特异增强显像效果。 方法: 1.采用静电吸附法将抗人肝细胞癌单克隆抗体HAb18结合到脂质体微泡表面,制备靶向脂质体微泡造影剂;玻片凝集实验、荧光免疫染色实验证明抗体与脂质体微泡的结合;花环形成实验、花环形成阻断实验及荧光免疫染色实验研究靶向脂质体微泡的体外寻靶作用;ELISA法检测靶向脂质体微泡上结合抗体的活性;细胞毒实验(MTT法)评价靶向脂质体微泡的安全性。 2.HHCC人肝癌细胞株体外培养传代,BALB/c-nu裸小鼠皮下接种,建立荷人肝癌裸鼠动物模型。分别用靶向脂质体超声造影剂或普通脂质体超声造影剂经荷肝癌裸鼠尾静脉注射超声造影(ICU),采用二次谐波显像模式(SHI),利用目测观察和视频灰阶分析技术,结合时间-强度曲线(TIC)来定量评价肿瘤的增强显像效果。 结果: 1.靶向脂质体微泡的玻片凝集实验、荧光免疫染色实验均为阳性;ELISA结果显示,靶向脂质体微泡中单抗的活性与游离单抗基本一致;靶向脂质体微泡围绕人肝