半胱胺对罗非鱼肠粘膜结构及非特异性免疫功能的影响

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本研究以尼罗罗非鱼(Oreochromis nilotica)为试验对象,基础饲料中分别添加不同水平半胱胺(300mg·kg-1、600mg·kg-1和900mg·kg-1)作为试验饲料,选用120尾2月龄、初重(75.0±5.0)g尼罗罗非鱼,随机分为4组,饲养42天后取样。研究半胱胺对尼罗罗非鱼肠粘膜结构及非特异性免疫功能的影响。(1)采用HE染色法检测罗非鱼肠绒毛形态变化,研究半胱胺对罗非鱼肠粘膜结构的影响。结果表明:试验组肠粘膜结构完整,层次清晰,肠绒毛排列整齐。与对照组相比,试验组前肠、中肠肠绒毛长度均有明显增加,而后肠绒毛长度则有不同程度的缩短;绒毛宽度变化不是很明显;试验组中肠、后肠肌层厚度比对照组显著增加(P<0.01),900mg·kg-1试验组前肠肌层厚度与对照组之间差异显著(P<0.01)。(2)采用AB-PAS染色法检测罗非鱼前肠、中肠和后肠杯状细胞分布情况及数量变化,探讨不同水平半胱胺对罗非鱼肠道内杯状细胞数量的影响。结果表明:前肠各组杯状细胞的数量差异不显著(P>0.05)。中肠、后肠部分,杯状细胞数量有增多趋势,600mg·kg-1、900mg·kg-1试验组杯状细胞数量与对照组之间差异极显著(P<0.01)。(3)采用奥新兰—沙黄染色法检测罗非鱼前肠、中肠和后肠肥大细胞分布情况及数量变化,探讨不同水平半胱胺对罗非鱼肠道内肥大细胞数量的影响。结果表明:与对照组相比,试验组罗非鱼前肠、后肠肥大细胞数量差异极显著(P<0.01),试验组之间差异不显著(P>0.05);中肠各组之间肥大细胞数量差异不显著(P>0.05)。(4)采用HE、酸性非特异性酯酶(ANAE)染色技术分别研究罗非鱼肠道上皮内淋巴细胞和酸性非特异性酯酶(ANAE)阳性细胞分布及数量变化。结果表明:试验组罗非鱼前肠、后肠上皮内淋巴细胞和ANAE阳性细胞的数量比对照组显著增加(P<0.01),各试验组之间差异不显著(P>0.05);中肠各组之间上皮内淋巴细胞和ANAE阳性细胞的数量差异不显著(P>0.05)。(5)采用心脏采血法,分别于试验第14天、28天和第42天采集罗非鱼血清,测定其血清中溶菌酶、过氧化氢酶、超氧化物歧化酶含量变化,研究不同水平半胱胺对罗非鱼非特异性免疫功能的影响。结果表明:饲料中添加不同水平半胱胺在一定程度上可提高罗非鱼血清中溶菌酶、过氧化氢酶、超氧化物歧化酶活力。在整个试验期内,溶菌酶活性有先升后降的趋势,在第28天测定时活性最高;过氧化氢酶则有先降后升的趋势,在第28天测定时活性最低:超氧化物歧化酶活性变化幅度不是很明显。结论:半胱胺能改善尼罗罗非鱼肠粘膜上皮细胞形态结构、肠绒毛长度、宽度和肌层厚度相关指标;同时,一定程度上增加肠粘膜杯状细胞、肥大细胞、上皮内淋巴细胞和ANAE阳性细胞的数量,从而改善肠道屏障及免疫功能;而且,一定程度上能够提高血清中溶菌酶、过氧化氢酶、超氧化物歧化酶的活力,从而增强尼罗罗非鱼非特异性免疫功能。
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