目的红细胞是哺乳动物体内含量最多的造血细胞。红细胞的形成过程起始于造血干细胞定向增殖分化形成红系祖细胞,接着进入到红系终末分化阶段,经数次有丝分裂依次分化为原幼红细胞、早幼红细胞、中幼红细胞和晚幼红细胞,随后晚幼红细胞会脱核形成网织红细胞,最后发育分化为成熟的红细胞。伴随着这个红系发育过程会发生细胞凋亡的现象,被称为eryptosis。有研究表明,在病理性和生理性条件下,细胞凋亡的发生都对成熟红细胞的产生有一定的作用。而凋亡基因RTN3是介导真核细胞三大凋亡通路的关键基因,通过对RTN3的研究,初步探索其在红系发育过程中的作用。方法为了研究RTN3在红系发育过程中的功能影响,我们首先构建RTN3敲低和过表达载体,通过慢病毒转导的方法分别得到RTN3敲低和过表达的K562和HEL细胞,从RNA水平和蛋白水平分别验证了RTN3的表达情况。其次用氯化高铁血红素诱导RTN3敲低型和过表达型的K562和HEL细胞向红系分化,与对照组相比,检测RTN3敲低和过表达对细胞增殖、分化和凋亡的改变。最后利用脐带血CD34~+细胞进行体外定向红系分化的探究,以慢病毒转导的方法敲低和过表达RTN3,与对照组相比,检测RTN3敲低和过表达对红系分化进程中细胞增殖、分化、凋亡、周期和脱核等重要生物学事件的改变。结果在红系发育过程中,RTN3敲低后细胞增殖活性显著低于对照组,晚幼红细胞脱核能力显著低于对照组,在红系终末分化中发现敲低RTN3会导致细胞周期受到阻滞,阻滞在S期,但是敲低RTN3之后细胞凋亡和分化能力均无差异。在红系发育过程中,RTN3过表达后细胞增殖活性显著低于对照组,细胞凋亡率也显著高于对照组,并且RTN3过表达引起的凋亡部分是caspase3依赖型的凋亡,但是细胞分化能力和晚幼红细胞的脱核能力都没有差异。结论在红系发育过程中,RTN3的表达量只有维持在一定范围才能维持细胞正常的增殖活性,RTN3对红系终末细胞的脱核也有一定的维持作用,RTN3介导的细胞凋亡部分是caspase3依赖型的,另外RTN3也参与到细胞分化和周期等红系重要生物学事件中。