非酒精性脂肪肝（non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD）是全球最普遍存在的肝病,与肥胖、高脂血症、糖尿病和动脉粥样硬化等疾病密切相关,目前临床上尚缺乏有效可靠的治疗药物。研究表明,转录辅激活子MED1（Mediator Complex Subunit 1）在肝脏脂质和能量代谢中扮演重要角色。课题组前期实验研究发现,MED1表达水平在肥胖小鼠（ob/ob）肝脏中上调;肝脏MED1特异性敲除的ob/ob(MED1ΔLiv-ob/ob)小鼠肝脏中固醇调节元件结合蛋白（SREBP1c）和脂质合成代谢基因表达下降。据此,本论文假设MED1可能通过SREBP1c/ACC轴调控肝脏脂质合成,进而影响肥胖性脂肪肝的发生。以MED1ΔLiv-ob/ob小鼠为动物模型,利用组织病理学、RNA-seq等技术研究肝脏MED1缺失对肥胖小鼠脂肪肝形成和肝脏脂质代谢的影响;通过MED1基因功能缺失实验,应用Co IP和Ch IP等技术明确肝细胞中MED1、SREBP1c与脂质合成代谢基因的分子关系,揭示MED1调控NAFLD发生的分子机制。本研究为深入探讨NAFLD的发病机理,进一步开发MED1作为治疗肥胖性脂肪肝的新靶点提供实验基础和理论依据。本研究获得主要实验结果如下:1.构建肝脏MED1敲低/缺失肥胖小鼠模型,研究MED1在肥胖小鼠脂肪肝发生发展中的作用。肝脏MED1表达降低减轻肥胖小鼠肝脂肪变性、降低肝脏甘油三酯含量和减少内脏脂肪组织炎症浸润。2.对ob/ob和MED1ΔLiv-ob/ob小鼠进行肝脏转录组测序分析,共筛选出1203个差异表达基因,通过GO、KEGG富集分析发现,与差异基因密切相关的信号通路有:PPAR信号通路、不饱和脂肪酸生物合成通路、脂肪酸分解通路、类固醇激素合成通路。进一步结合转录组分析和RT-PCR验证,获得与MED1有关的脂质代谢相关基因如乙酰辅酶A羧化酶（ACC）、硬脂酰辅酶A去饱和酶1（SCD1）、细胞死亡诱导DNA断裂因子相似蛋白a（Cidea）等。提示MED1可能影响脂质合成代谢相关基因表达,进而参与脂肪肝的形成。3.采用棕榈酸PA处理Hep G2细胞模拟体内肝脂肪变性和利用小干扰RNA（si MED1）干扰MED1的m RNA水平,表明MED1缺失可显著降低PA诱导的Hep G2细胞中脂质沉积。提示MED1可能通过影响肝细胞脂质合成来参与肝脂肪变性。4.Co IP实验结果表明MED1与SREBP1c存在蛋白互作;ACC基因启动子区上游存在3个SRE结合位点。Ch IP实验表明MED1缺失后,减少SREBP1c在ACC基因启动子区的富集;MED1缺失后ACC基因启动子区H3K4me1和H3K27ac的富集具有减少趋势。