KAI1/CD82基因在不同转移习性的人鼻咽癌细胞株中表达水平的研究

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背景:鼻咽癌是当今世界上对人类健康和生命危害较大的恶性肿瘤之一。侵袭和转移是鼻咽癌的恶性标志和特征,也是导致鼻咽癌患者治疗失败和死亡的主要原因。鼻咽癌侵袭转移是一个多步骤、多阶段发生及多基因参与调控的过程。已有的研究表明,参与调控鼻咽癌侵袭转移的基因包括正向调控和负向调控基因,KAI1基因可能是一种鼻咽癌侵袭转移正向调控基因,即抑制鼻咽癌侵袭转移的基因。KAI1基因属四跨膜超家族(transmembrance-4-superfamily, TM4SF)的成员,其结构为细胞膜糖蛋白,具有4个高度保守的跨膜结构区。KAI1蛋白对多种肿瘤的转移具有抑制作用,其表达下调与前列腺癌、胰腺癌、肺癌、结肠癌和膀胱癌的淋巴结和远处转移密切相关。有关KAI1基因调控鼻咽癌侵袭转移的分子机理尚未阐明。目的:本研究的目的是体外培养5种不同组织学类型的人鼻咽癌细胞株CNE-1(高分化鳞癌)、CNE-2Z (低分化鳞癌)、SUNE-1(低分化鳞癌癌细胞系)、SUNE-1-5-8F(高成瘤,高转移)、SUNE-1-6-10B(成瘤,低转移),探讨不同转移潜能的人鼻咽癌细胞株中KAI1/CD82基因mRNA和蛋白表达水平的差异,并为课题组下一步实验提供细胞理论基础。方法:1.应用实时荧光定量PCR法(real-time PCR)检测5种人鼻咽癌细胞株中KAI1/CD82基因mRNA的表达水平;2.免疫组化和Western blot两种方法检测5种人鼻咽癌细胞株中KAI1/CD82蛋白的定位及表达水平。结果:1.应用实时荧光定量PCR法(real-time PCR)检测,发现不同转移习性的人鼻咽癌细胞均扩增出KAI1/CD82mRNA,且随着细胞转移习性增高,KAI1/CD82mRNA表达水平逐渐降低(p<0.05);2.通过Western-blot技术检测了KAI1/CD82在人鼻咽癌细胞中的表达,结果显示,KAI1/CD82在SUNE-1-6-10B和CNE-1中表达增高,其中在SUNE-1-6-10B中增高明显(p<0.05);3.通过免疫组织化学方法检测了KAI1/CD82在鼻咽癌细胞中的表达,结果表明KAI1/CD82在鼻咽癌细胞中的细胞膜和/或细胞质中表达。结论:1.研究发现KAI1/CD82基因在mRNA水平和蛋白水平的表达具有一致性,随着KAI1/CD82基因在不同人鼻咽癌细胞株中mRNA水平表达的增高,在蛋白水平表达也呈增高趋势;2. KAI1/CD82基因在低转移性细胞中高表达,而在高转移性细胞中低表达,提示了KAI1/CD82可能在鼻咽癌肿瘤细胞转移机制中发挥重要的抑制作用。
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