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背景和目的:
在正常条件下KB-R7943能降低致命性的心肌缺血再灌注损伤,但是在特定病理条件下是否具有心肌保护效应还不清楚,我们的研究目的就是探讨在高胆固醇条件下KB-R7943是否降低心肌坏死和凋亡及可能的K+ATP通道。
实验方法:
60只雄性Wister大鼠随机分为5组,每组12只。第1组(NC):正常饲料喂养6周大鼠,离体心脏进行25分钟全心缺血,120分钟再灌注。第2组高胆固醇组(HC): NC组被重复,只是动物是利用含1.5%胆固醇的饲料喂养6周。第3组KB-R7943干预组(HKB): HC组被重复,只是在再灌注开始时注入1μMKB-R7943,维持10分钟。第4组KB-R7943联合格列苯脲组(HGKB):HKB组被重复,只是在再灌注时再加入0.3μM K+ATp阻滞剂(格列苯脲),维持10分钟。第5组格列苯脲组(HGLY): HC组被重复,但是在再灌注开始时注入0.3μM格列苯脲,维持10分钟。本实验应用酶法法检测血清总胆固醇TC,选择性沉淀法检测高密度脂蛋白HDL-C、低密度脂蛋白LDL-C,MP150心功能记录仪检测心功能,TTC染色法检测心肌梗死面积,TUNEL法检测凋亡。对数据进行统计分析。
结果:
1、高胆固醇饲料喂养的大鼠(HC,HKB,HGKB,HGLY组)血清中TC,LDL-C明显高于正常饲料喂养的大鼠(NC组)(P<0.05)。而HDL-C并未发现有明显差异(P>0.05)。
2、在缺血前基线水平NC组HR明显高于其他4组,各组LVDP,+dp/dt,-dp/dt无明显差异,再灌注前30分钟各组HR无明显变化,但是在HKB组LVDP,+dp/dt,-dp/dt和HC比有明显差异,HGKB组、HGLY组和HC无明显差异。
3、NC组、HC组和HGLY组分别是35±5.0%,46±8.7%,47±8.5%(NC vs.HC,P<0.05; HC vs.HGLY,P>0.05),KB-R7943降低心肌梗死面积至28.6±3.3%(HKBvs.HC,P<0.05),格列苯脲(HGKB)能消除KB-R7943的保护效应且本身单独应用不增加心肌梗死面积。
4、NC、HC、HGLY组的凋亡细胞百分数分别为7.1±1.4%,14.8±3.0%,13.6±3.1%(NC vs.HC,P<0.05; HC vs.HGLY,P>0.05)。KB-R7943(HKB)显著的降低凋亡百分率至5.4±1.5%(HKB vs.HC,p<0.05),格列苯脲(HGKB)消除了KB-R7943的降低凋亡作用13.1±1.7%(HGKB vs.HKB,p<0.05),其单独应用不增加心肌凋亡。
结论:
饮食诱导的高胆固醇血症加重缺血再灌注损伤,KB-R7943在高胆固醇模型下可能通过线粒体钾通道来减少心肌坏死和凋亡。