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第一部分：腺病毒介导FasL基因转移诱导胃癌细胞凋亡 目的：探讨FasL基因诱导人胃癌细胞凋亡以及基因治疗胃癌的可能性。方法：构建重组腺病毒载体，将FasL基因转移到不表达或低水平表达FasL的人胃癌细胞系（SGC-7901等5株细胞），对FasL基因的表达，细胞生长的抑制和对肿瘤生长模型的治疗效果进行分析。结果：1)成功地构建FasL重组腺病毒（Ad-FasL）和对照病毒Ad-LacZ，基因转染：2)经两周的筛选得到G418抗性克隆即转基因的细胞克隆（SGC-7901-FasL）和空载体克隆（SGC-7901-vect）；3)在蛋白质水平上，通过FACS分析转染FasL的G418抗性细胞获得FasL稳定表达；同样分析转染Ad-LacZ的G418抗性细胞克隆未获得FasL的表达；4)在mRNA水平上，提取细胞总RNA，根据设计引物，通过RT-PCR，扩增FasL胞外区基因片段，鉴定出FasL基因在细胞上的稳定表达；5)SGC-7901细胞感染FasL后，两天出现细胞变圆，细胞浆出现空泡，随即脱落死亡。MTT法检测FasL感染的SGC-7901细胞表明FasL有抑制肿瘤细胞生长的作用，其生长抑制率为84％。集落形成能力检测证实FasL感染的SGC-7901细胞无集落形成；6)FACS检测证实，转染FasL基因后，SGC-7901细胞S期和G2期比例下降，G1期比例增加，表明FasL基因能抑制胃癌细胞的增殖，并且有明显的凋亡峰出现（即亚G1峰），也表明FasL基因有诱导SGC-7901细胞凋亡的作用；7)DNA凝胶电泳示有典型的DNA梯状条带；8)Ad-FasL对SGC-7901裸鼠皮下移植瘤模型生长抑制率为34％。结论：FasL基因 Fds卜、pZI——’‘””和 B7－14＠对胃g细胞系生物学行为影响的实验研究 中义摘妄 参与了肿瘤细胞凋亡的诱导，并抑制肿瘤细胞的增殖，最终能抑制肿瘤 细胞的生长。因此，FasL基因仑肿瘤的基因治疗上有广泛的应用前景。