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目的:羊水膜内转运是羊水吸收的重要调节方式,对羊水量的平衡起了重要作用,但其细胞和分子机制还不清楚。通过研究人羊膜上皮细胞AQP8的表达和调控,探讨羊水跨膜转运机制,为临床羊水量异常寻找治疗策略提供理论依据。方法:(1)培养人羊膜上皮细胞WISH株。随机分为实验组和对照组,对照组予以正常培养液常规培养。实验组分为3组:低渗组、高渗透组、环磷酸腺苷(cycliadenosine monophosphate,cAMP)组。低渗透组将细胞培养液稀释至80%,60%两组,继续培养羊膜上皮细胞;高渗组将细胞培养液浓缩至120%,140%两组,继续培养羊膜上皮细胞;cAMP组将8-Br-cAMP加入培养液,使其在细胞培养液中浓度分别为10μM、20μM、40μM、100μM、200μM、400μM,分别培养羊膜上皮细胞。各组分别在培养2h、4h、8h、16h、24h和48h时取样。各组重复培养6瓶(。2)采用Western blot技术定量检测WISH细胞AQP8蛋白表达。(3)采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术半定量检测WISH细胞AQP8 mRNA的表达。(4)采用免疫荧光组织化学方法原位检测WISH细胞上AQP8的分布。