环境因素对微囊藻毒素基因表达量的影响及水生植物对微囊藻毒素的抗性机制

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利用RT-PCR方法从铜绿微囊藻PCC7806总RNA中扩增出目的基因片段,将基因片段插入pGEMT-T Easy中来制备质粒标准品。通过不同连续稀释倍数的质粒标准品成功构建了16srRNA、mcyH和mcyB三基因的标准曲线,该法构建的三基因标准曲线r~2分别为0.9916、0.9938和0.9939,并且质粒标准品具有较好的重复性,满足实时荧光定量RT-PCR的要求。利用已构建好的标准曲线,采用荧光定量RT-PCR和ELISA的方法对不同温度、光照和不同浓度植物生长调节剂2-异戊烯腺嘌呤条件下铜绿微囊藻PCC7806的mcy基因转录水平和产毒情况进行了研究,结果表明:随光照强度的增大,mcyH和mcyB两基因的转录水平表现出增强的趋势,基因的转录水平和产毒量在各温度条件下没有显著差异,而植物生长调节剂2ip会抑制产毒量和降低转录水平,但总体上mcyH和mcyB的转录水平不与毒素含量相关。本文还研究了小叶浮萍和穗花狐尾藻对0、0.1、0.5、1.0及4.3mg/L的微囊藻毒素的耐受能力及两种植物过氧化氢酶(CAT)和超氧化物歧化酶(SOD)活性的变化。结果表明:当毒素浓度超过0.5 mg/L时,小叶浮萍的生长会被明显抑制,同时,SOD的活性也显著低于对照组,而各浓度毒素对穗花狐尾藻生长的抑制却不明显,并且发现其SOD活性与毒素浓度呈极显著正相关。上述结果说明穗花狐尾藻比小叶浮萍对微囊藻毒素的耐受能力更强,而SOD则有利于提高植物体的耐受力。此外,本实验还发现两种植物的CAT活性与毒素浓度和植物耐受能力均无线性关系。
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