三种胶原膜理化性质以及其降解产物的成骨特性的研究

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目的:探究不同来源的三种胶原膜的理化性质,如表面微观形态、孔隙率、机械性能、降解性、接触角,以及探究其降解产物对骨髓间充质干细胞的影响的比较,了解各种胶原膜的特性有助于为临床病例的选择提供参考。方法:扫描电子显微镜观察三种胶原膜的表面微观形态,如粗糙度、纤维排列;三种胶原膜浸泡于PBS溶液测定其孔隙率或溶胀特性;万能测试机测定三种胶原膜的拉伸强度及最大伸长率,胶原膜于PBS溶液、人工唾液、胶原酶溶液中降解,1、2、3、7、14、21天后测定其降解速率,同时降解后胶原膜通过扫描电子显微镜观察胶原膜微观表面形貌的变化,水滴角测量仪测定三种胶原膜的接触角;通过细胞实验比较胶原膜降解产物对BMSCs的细胞增殖及细胞分化的影响。结果:扫描电子显微镜观察了不同胶原膜的光滑面与粗糙面的表面形态。无论从低倍数还是高倍数观察,桀亚真皮和Bio-Gide的粗糙面的表面微观形态复杂,有大量的胶原纤维排列,且排列无序;而两者的光滑面相对比较致密。从低倍数观察,吉特瑞的粗糙面和光滑面并无明显差异,从高倍数观察,粗糙面可见少量胶原纤维排列。在横断面观察,桀亚真皮和Bio-Gide可见粗糙面和光滑面分层明显,可见微孔样结构;而吉特瑞膜分层不明显和物微孔样结构。Bio-Gide的孔隙率最大,吉特瑞次之,吉特瑞最小;在干燥状态下,桀亚真皮和吉特瑞的拉伸强度较大且无明显差别,Bio-Gide的最大伸长率最大,在湿润状态下,三种胶原膜的拉伸强度明显减小,Bio-Gide的拉伸强度最小,桀亚真皮的拉伸强度最大;在最大伸长率中,桀亚真皮和Bio-Gide明显增大;对比三种降解液,胶原酶溶液的降解性最大,PBS溶液降解下吉特瑞的降解率最大,在人工唾液和胶原酶降解下,Bio-Gide和吉特瑞的降解率最大,桀亚真皮降解率最小。扫描电子显微镜观察降解后胶原膜可见表面形态平坦,胶原纤维消失,粗糙度下降。粗糙面的接触角相对于光滑面较小,Bio-Gide比桀亚真皮及吉特瑞的接触角小,亲水性较强。各组对BMSCs的增殖作用随着时间的推移逐渐增加。桀亚真皮和吉特瑞降解产物对BMSCs细胞的增殖作用高于Bio-Gide组。随着时间的增加,各组之间的ALP活性逐渐增加,在14天时吉特瑞组的ALP活性最高。结论:本研究通过对表面微观形态、孔隙率、机械性能、降解特性、接触角及降解产物的成骨特性等多种方面探索研究,得出桀亚真皮和Bio-Gide的表面形貌更有助于细胞附着和生长,Bio-Gide的孔隙率更有助于营养物质的扩散,桀亚真皮和吉特瑞的机械强度较大,更适合抵抗软组织压力大的病例,桀亚真皮的降解最小,在骨再生时比较稳定,Bio-Gide的亲水性更强,桀亚真皮和吉特瑞降解产物对BMSCs的增殖和分化作用较大,即不同胶原膜各有优势,可根据临床需要选择相应的胶原膜。
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