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目的:探讨载脂蛋白M(apolipoprotein M,apoM)在胆固醇摄取与外流中的作用及可能机制。方法:体外培养小鼠巨噬细胞系Ana-1细胞,以不同浓度的NBD-胆固醇(2.5μM、5μM、10μM)孵育Ana-1细胞,分别在0 h、0.5 h、1 h、2 h、4 h、6 h、8h、12 h收集培养上清液及细胞裂解液,荧光检测仪测定荧光信号强度,计算Ana-1细胞对NBD-胆固醇的摄取率。利用腹腔巨噬细胞富集方法,分别采集野生型小鼠、apoM基因敲除小鼠、SR-BI基因敲除小鼠以及apoM/SR-BI基因双敲除小鼠的腹腔巨噬细胞,以10μM NBD-胆固醇孵育,在1 h、2 h、4 h、6 h、12 h收集培养上清液和细胞裂解液,测定荧光强度,计算腹腔巨噬细胞对NBD-胆固醇的摄取率。以小鼠巨噬细胞系Ana-1细胞为研究对象,10μM NBD-胆固醇孵育Ana-1细胞构建荷脂巨噬细胞模型。外流实验分为三部分:(1)比较人重组apoM蛋白(rh-apoM)、20μg/ml apoM~-HDL和20μg/ml apoM~+HDL对Ana-1细胞胆固醇外流的差异:分别以10μg/ml rh-apoM、20μg/ml apoM~-HDL和20μg/ml apoM~+HDL干预细胞,分别在0 h、0.5 h、1 h、2 h、4 h、6 h、8 h收集诱导外流液和细胞裂解液,测定荧光强度;(2)比较不同浓度rh-apoM对Ana-1细胞胆固醇外流的差异:分别以10、50、100μg/ml rh-apoM干预细胞,4 h后测定荧光强度;(3)比较rh-apoM与apoM~+HDL(或apoM~-HDL)共同诱导对Ana-1细胞胆固醇外流的差异:以apoM~+HDL(或apoM~-HDL)、不同浓度的rh-apoM(10-100μg/ml)与apoM~+HDL(或apoM~-HDL)混合后干预细胞,4 h后测定荧光强度。结果:在体外,Ana-1细胞对NBD-胆固醇的摄取率在2.5-10μmol/L的范围内与胆固醇浓度呈正相关。Ana-1细胞及小鼠来源的巨噬细胞对NBD-胆固醇的摄取在6 h均达峰值,且达峰时间不受NBD-胆固醇孵育液浓度和细胞基因型的影响。apoM/SR-BI基因双敲除小鼠的腹腔巨噬细胞对NBD-胆固醇的摄取率明显低于SR-BI基因敲除小鼠和apoM基因敲除小鼠(t=6.8、13.66,P<0.05)。在体外,apoM~+HDL和apoM~-HDL都能促进巨噬细胞中NBD-胆固醇外流,apoM~+HDL诱导组的NBD-胆固醇外流率明显大于apoM~-HDL组(24.65±0.93%vs10.85±0.64%,P=0.0003)。rh-apoM并不能有效地促进NBD-胆固醇外流。与单独apoM~-HDL组相比,加入rh-apoM可抑制apoM~-HDL组的NBD-胆固醇外流。结论:在体外,apoM参与了巨噬细胞对胆固醇的摄取和外流。rh-apoM并不能有效促进胆固醇的外流,但可能参与调节HDL介导的胆固醇外流。