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本文以三种不同发酵程度的茶叶(黄山毛峰、大红袍、祁门红茶)为原料,采用甲醇溶剂法萃取茶多酚,用HPLC法对其主要组成成分进行定性定量分析。将所得到的茶多酚提取物(tea polyphenol extracts)分别灌胃C57BL/6J小鼠7 d,采用实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR)和Western blot法,检测其对小鼠肝Cyp450s(Cyp3a11、Cyp2e1、Cyp2c37、Cyp1a2)和PXR mRNA及其蛋白表达的量效关系;将三种茶多酚提取物以适当剂量分别灌胃C57BL/6J小鼠7、14、28 d,检测其对小鼠肝Cyp450s(Cyp3a11、Cyp2e1、Cyp2c37、Cyp1a2)和PXR mRNA及其蛋白表达的时效作用;在人肝癌HepG2细胞中,用瞬时共转染报告基因实验研究茶多酚提取物对PXR介导的CYP450s基因的转录激活。本文为探究茶多酚对肝药酶的调控机制提供理论依据。主要结论如下:(1)采用Folin-Ciocalteu和HPLC法对茶多酚提取物进行多酚含量测定和组分分析,结果表明:黄山毛峰、大红袍、祁门红茶多酚提取物总多酚含量分别为434.11±8.76、401.94±2.90、282.19±6.47 mg GAE/g DW。其中黄山毛峰多酚提取物主要含有表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)、表儿茶素没食子酸酯(ECG)、儿茶素(C)、表没食子儿茶素(EGC),分别为265.57、133.05、69.27、64.92μg/mg;大红袍多酚提取物含量较高的有EGCG、ECG、EGC、没食子酸(GA),分别为173.36、73.14、23.74、13.92μg/mg;祁门红茶多酚提取物含有较高的EGCG、C、GA,分别为82.94、28.55、20.45μg/mg。(2)将黄山毛峰、大红袍、祁门红茶多酚提取物对小鼠肝Cyp3a11、Cyp2e1、Cyp2c37、Cyp1a2及PXR的量效关系进行研究,结果表明:黄山毛峰与大红袍茶多酚提取物显著诱导Cyp3a11、Cyp2c37 mRNA表达(P<0.05),对Cyp2e1、Cyp1a2mRNA表达总体呈显著抑制作用(P<0.05);对Cyp3a11、Cyp2e1、Cyp2c37、Cyp1a2的蛋白表达有显著诱导作用(P<0.05)。祁门红茶多酚提取物对Cyp3a11、Cyp2e1、Cyp2c37、Cyp1a2 mRNA及其蛋白表达存在显著作用(P<0.05)。总体来说,黄山毛峰、大红袍、祁门红茶多酚提取物显著诱导小鼠肝PXR mRNA及其蛋白表达。(3)将黄山毛峰、大红袍、祁门红茶多酚提取物对小鼠肝Cyp3a11、Cyp2e1、Cyp2c37、Cyp1a2及PXR作用的时效关系进行研究。结果表明:黄山毛峰多酚提取物灌胃C57BL/6J小鼠7、14、28 d后,显示其对Cyp3a11、Cyp2e1、Cyp2c37、Cyp1a2 mRNA及蛋白表达均具有显著影响(P<0.05)。给予大红袍多酚提取物7 d后,显著诱导Cyp3a11、Cyp2c37 mRNA表达,对Cyp2e1、Cyp1a2 mRNA表达具有显著抑制作用,14、28 d后对Cyp3a11、Cyp2e1、Cyp2c37、Cyp1a2 mRNA的表达均呈显著诱导作用;7、14、28 d灌胃后,对Cyp3a11、Cyp2e1、Cyp2c37、Cyp1a2的蛋白表达有显著作用(P<0.05)。灌胃祁门红茶多酚提取物7、14、28 d后对Cyp3a11、Cyp2e1、Cyp2c37、Cyp1a2 mRNA表达具有显著影响(P<0.05),总体呈下调趋势;7、14、28 d后,对Cyp3a11、Cyp2e1、Cyp2c37的蛋白表达有显著作用(P<0.05),对Cyp1a2蛋白表达无明显作用,总体均呈下调趋势。灌胃黄山毛峰、大红袍、祁门红茶多酚提取物7、14、28 d后对PXR mRNA及蛋白表达均具有显著影响(P<0.05)。(4)黄山毛峰、大红袍、祁门红茶多酚提取物100、200、300μg/mL对CYP3A4荧光素酶活性均有不同程度显著增强作用(P<0.05),表明三种茶叶多酚提取物可能作为PXR的配体从而激活CYP3A4 DNA反应元件从而上调CYP3A4的表达。综上所述,黄山毛峰、大红袍、祁门红茶多酚提取物对CYP450s mRNA和蛋白表达具有显著影响,从而影响其它CYP450s底物在体内的代谢,这一过程可能与多酚提取物对PXR的激活有关。