大型海藻角叉菜活性成分的研究

来源 :大连海洋大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:Amjf123456
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本文以大连黄渤海域的大型海藻——角叉菜为原料,研究其中的化学成分及清除自由基、抑制ACE和PEP等活性。采用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇依次对角叉菜的乙醇提取物进行梯度萃取,得到三种极性大小不同的浸膏。通过多种色谱分离、纯化方法相结合,对角叉菜各浸膏部分进行系统的分离,获得12种化合物。通过理化常数测定、波谱数据(NMR、MS等)分析等方法鉴定了其中5种化合物的结构,分别为胆甾醇、角叉菜甘油糖脂A、角叉菜甘油糖脂B、角叉菜甘油糖脂C和3’-(1-丁基磷酰基)腺苷,其中角叉菜甘油糖脂A、角叉菜甘油糖脂B、角叉菜甘油糖脂C和3’-(1-丁基磷酰基)腺苷四种化合物均为首次从角叉菜中分离得到。采用闪式破碎辅助萃取结合热水提取角叉菜多糖,并优化其提取方法。考察料液比(A)、闪式破碎时间(B)、热回流提取时间(C)、提取温度(D)四个单因素对角叉菜多糖提取率的影响。获得制备角叉菜多糖的适宜条件为:提取时间2.5h,提取温度95℃,料液比为1:25,闪式破碎时间4min。结合30%、50%、80%乙醇对多糖粗品的分级沉淀,获得三种角叉菜多糖JCC-3、JCC-5、JCC-8。经凝胶柱色谱对三个组分多糖初步进行纯化,并测量三种组分多糖的硫酸基团含量分别约为45.87%、26.78%、31.94%,均值约为35%。对角叉菜乙醇层提取物、石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物进行体外清除自由基和抗肿瘤实验。对角叉菜乙醇提取物和水提取物进行抑制体外酶--血管紧张肽Ⅰ转化酶(angiotensin I converting enzyme,ACE)脯氨酸内肽酶(proline endopeptidase,PEP)实验。结果表明,四种提取物在浓度分别为0.01、0.1、1mg/mL时对DPPH·自由基具有一定的清除活性,活性大小与浓度呈剂量依赖关系;对·OH自由基和·O2ˉ自由基的清除活性不明显。角叉菜的各提取物对ACE没有明显的抑制活性;角叉菜的水层提取物对PEP活性具有一定的抑制活性,IC50值为25.24μg/mL。在抑制肿瘤活性测试中发现,上述四种提取物对肿瘤细胞HeLa、MCF-7细胞有一定的抑制活性,对Hep-G2细胞没有明显抑制活性。对多种大型海藻的醇提物、水提物进行了抑制ACE活性、抑制PEP活性的筛选。实验结果表明,扇形叉枝藻、舌状蜈蚣藻、珊瑚藻、孔石莼4种海藻的醇提取物对ACE的抑制活性较高,IC50值分别为20.90、40.56、74.93、124.18mg/mL;扇形叉枝藻、肠浒苔、网地藻、裂叶马尾藻的水提取物对ACE的抑制活性较高,IC50值分别为64.94、58.58、23.26、67.88 mg/mL。5种海藻——叉开网翼藻、裂叶马尾藻、松节藻、舌状蜈蚣藻、硬球毛藻的乙醇提取物对PEP有明显的抑制活性,其活性存在剂量依赖关系,IC50值分别为147.64、36.09、123.88、135.36、77.38μg/mL。叉开网翼藻、硬球毛藻、海黍子、裂叶马尾藻、松节藻、羊栖菜水提取物IC50值分别为6.53、11.27、17.34、19.40、19.00、32.71μg/mL,抑制率相对较高;扇形叉枝藻、舌状蜈蚣藻、珊瑚藻、鼠尾藻的水提取物也具有一定的抑制作用,IC50值分别为132.37、103.36、147.52、135.70μg/mL。故上述提取物具备一定的抗高血压和抗抑郁活性。论文将为开发利用角叉菜及大型海藻资源奠定一定的理论基础。
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