牵张力和Apelin单独或联合作用对MG-63成骨样细胞增殖和分化的影响

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目的:探讨牵张力和Apelin单独或联合作用对MG-63成骨样细胞增殖分化的影响。方法:取人成骨肉瘤MG-63细胞株复苏、培养备用。采用根据四点弯曲加力原理设计的细胞加力装置,加张应力,大小分别为0、1000.2000.4000、6000、strain。在培养基中加或不加0-100nM的Apelin。对不同力值、不同时点、加或不加Apelin的MG-63细胞进行分组。然后分别用α-磷酸奈酚法测定细胞内的碱性磷酸酶活性(ALP); ELISA试剂盒测定释放至培养基中的前胶原IC-端前肽(PICP),检测Ⅰ型胶原的表达;[3H]胸腺嘧啶掺入法对细胞增殖进行检测。结果:当应变值为2000μstrain时,牵张力对MG-63成骨样细胞ALP活性、Ⅰ型胶原分泌和[3H]胸腺嘧啶的表达的促进作用最强。12h内牵张力呈时间依赖性上调ALP活性,之后缓慢下降;18h内牵张力呈时间依赖性促进Ⅰ型胶原分泌,之后缓慢减少。Apelin对MG-63成骨样细胞的ALP活性和Ⅰ型胶原分泌无影响。不同浓度的Apelin可以促进[3H]胸腺嘧啶的表达,InM Apelin可起到显著促进作用。当应变为2000μstrain时加力3h时,加不同浓度的Apelin,ALP的活性和Ⅰ型胶原的分泌与单纯加力组相比无统计学意义(P>0.05),而[3H]胸腺嘧啶的表达与单纯加Apelin组相比显著增加,有统计学意义(P<0.05)。结论:适宜的牵张力刺激可以促进MG-63成骨样细胞的增殖分化,Apelin可以促进MG-63成骨样细胞的增殖,但对其分化并无影响。二者可以协同加强促进MG-63成骨样细胞的增殖,但对其分化无协同加强作用。
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