创伤愈合中降钙素基因相关肽(CGRP)对表皮干细胞迁移、趋化作用的研究

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干细胞( stem cell , SC)研究开始于20世纪60年代,随着生物实验技术的发展,干细胞的研究取得了突破性进展。近年来,人们已在体外分离纯化、鉴别、扩增和培养表皮干细胞.表皮干细胞研究对了解皮肤修复及皮肤癌发生机制有重要作用。表皮干细胞的研究已经历了20多年,目前仍处于实验观察阶段,但已展示了良好的临床应用前景。表皮干细胞标志物迄今为止,尚未见有表皮干细胞特异性的标志物的研究报道。目前学术界比较认可并应用广泛的是BrdU、β1整合素和角蛋白19(K19),其依据是表皮干细胞在形态学上表现为非成熟细胞特征、较强的自我更新能力及对β1整合素和角蛋白19(K19)的特异表达。因此,本实验采用β1整合素、K19等多种干细胞表面标记物结合BrdU标记来鉴定表皮干细胞以求能得出更加准确和客观的结果。神经肽:既往的研究表明皮肤发育及创伤愈合过程中表皮干细胞和感觉神经在分布的时间、空间上有密切关系.目前,已有实验证明感觉神经肽P物质还可以促进表皮干细胞大量募集于创缘与肉芽组织中,从而加速伤口的愈合。降钙素基因相关肽(CGRP)尚未见有促进表皮干细胞聚集的研究报道。研究目标探讨创伤愈合中CGRP对表皮干细胞迁移、趋化作用的影响.验证前人关于SP在创伤愈合中所起作用的研究结果,并比较CGRP和SP作用的异同。方法将新生SD大鼠腹腔注射BrdU(BrdU为一种核标记物,可作为表皮干细胞的示踪剂),正常饲养60天后,分为CGRP组、SP组、辣椒素组和对照组,四组均致背部全层皮肤缺损,CGRP组和SP组致伤当天开始创面给予CGRP和SP(1次/ d) ,辣椒素组致伤前1周皮下预注射辣椒素(capsaicin),观察四组创面愈合速度和表皮干细胞的迁移特征。结果CGRP组与SP组的创面愈合速度最快,创缘BrdU阳性细胞率最高,峰值出现最早;辣椒素组愈合速度最慢,BrdU阳性细胞率最低,峰值出现晚;CGRP组和SP组除创缘外,在创面肉芽组织中也出现了BrdU阳性细胞,另两组未出现。结论CGRP能明显加速创面愈合速度,并具有诱导表皮干细胞向创缘集中和向创面肉芽组织中迁移的作用。
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