定时脉冲释药系统又称智能给药系统,是一种在疾病发作前给药,经过预定的非释药时间(时滞)后,根据生理需要在很短的时间内迅速释放一定量药物的新型给药系统,该给药系统主要用于治疗和预防节律性发作的疾病。帕金森病(PD)又称震颤麻痹,是继阿尔茨海默病之后中老年人常见的进行性中枢神经变性疾病,该病导致的运动功能障碍严重影响患者的生存质量,给社会和家庭生活带来了沉重负担。左旋多巴(L-dopa)是治疗帕金森病及其综合症最有效的一线药物,但长期服用传统左旋多巴类制剂的过程中伴随病程呈进行性发展会使患者在清晨出现严重的晨僵现象。目前的治疗方案由于没有考虑到晨僵现象发病的时间节律性,给药方式不符合时间药理学原理,给药剂量大,不良反应多,导致患者的顺从性差。因此,研制符合帕金森病发病时间节律性的给药系统是亟待解决的问题。本课题根据帕金森病的时间生理学、时间药理学和时间治疗学的原理,以左旋多巴为模型药物,采用溶蚀塞型定时脉冲胶囊技术结合胃漂浮技术及静水压原理,研制符合帕金森病发病时间节律性的给药系统――左旋多巴漂浮型脉冲胶囊,使患者可在临睡前服用该胶囊,经7小时时滞后于次日清晨在胃内脉冲释药,迅速起效,改善患者的晨僵现象,同时还可提高生物利用度、减少左旋多巴用量,对治疗帕金森病及其综合症具有重要意义。第一部分左旋多巴漂浮型脉冲胶囊的设计原理及处方前研究1.根据帕金森病的时间生理学、时间药理学和时间治疗学的原理,采用溶蚀塞型定时脉冲胶囊技术结合胃漂浮技术及静水压原理,设计了具有定时、定位释药功能的新型给药系统――左旋多巴漂浮型脉冲胶囊。该给药系统由非渗透性胶囊体、溶蚀塞片、含药速释片、泡腾填充颗粒以及可溶性囊帽五部分组成。2.经紫外扫描表明L-Dopa在0.1mol·L-1盐酸溶液、pH6.8磷酸盐缓冲液、超纯水中的最大吸收波长均为280nm。采用紫外分光光度法,建立了L-Dopa在0.1mol·L-1盐酸溶液、pH6.8磷酸盐缓冲液、超纯水三种介质中的含量测定方法,在1-60μg·ml-1的范围内浓度与吸收度均呈良好的线性关系,其回归方程分别为:A=0.0166+0.0140C(r=0.99992), A=0.0017+0.0158C(r=0.99965),A=0.0007+0.0136C(r=0.99990)。第二部分左旋多巴漂浮型脉冲胶囊的制备1.以乙基纤维素(EC45cp)为材料、二氯甲烷/无水乙醇/乙酸乙酯为溶剂,采用经优化的制备工艺,制备出囊体成形良好、囊口平整、透明、光洁、无异臭、硬度及韧性良好的非渗透性EC胶囊。2.以L-Dopa为主药,乳糖为填充剂,分别以崩解时间、休止角、硬度、脆碎度等为评价指标,经单因素试验筛选出优选处方:主药(50%左旋多巴)、填充剂(25.75%乳糖)、粘合剂(20%微晶纤维素)、崩解剂(3%交联羧甲基纤维素钠)、润滑剂/助流剂(0.25%硬脂酸镁和1%微粉硅胶),经自制三维混合器混合,直接压片工艺制备得到左旋多巴速释片,其外观完整、光洁、色泽均匀、硬度、脆碎度、崩解时限、重量差异均符合《中国药典》要求。3.以柠檬酸、乳糖、碳酸氢钠为原料,10%PVP乙醇溶液为粘合剂,采用非水制粒法,制备出颗粒均匀、外观干燥、色泽一致、无吸潮、无结块、无潮解的泡腾颗粒,经溶化性、外观检查均符合《中国药典》有关规定。4.以HPMC-E50、乳糖为原料,经直接压片工艺制备出溶蚀塞片。以释药时滞(Tlag)为评价指标,考察了HPMC-E50的用量对释药时滞的影响,表明释药时滞随其用量增加而增大。并从中筛选出满足设计要求的4、5号处方纳入进一步研究。第三部分左旋多巴漂浮型脉冲胶囊体外释放的研究1.采用溶出度仪,以900ml人工胃液为释放介质、温度37℃±0.5℃,考察4、5号处方的溶蚀塞片在转速为50r/min和100r/min条件下的释药时滞。4号处方50r/min的释药时滞为389±20min、100r/min时为252±18min;5号处方50r/min的释药时滞为438±18min、100r/min时为281±15min。表明左旋多巴漂浮型脉冲胶囊的释药时滞随转速的增加而减小。2.采用溶出度仪,以转速为50r/min、温度37℃±0.5℃,人工胃液900ml或1%HPMC-K4M人工胃液900ml为释放介质,考察粘度对释药时滞的影响。结果显示,4号处方在人工胃液中的释药时滞为389±20min、1%HPMC-K4M人工胃液的释药时滞为428±16min;5号处方在人工胃液的释药时滞为437±18min、1%HPMC-K4M人工胃液的释药时滞为491±24min。表明左旋多巴漂浮型脉冲胶囊的释药时滞随粘度的增加而增大;1%HPMC-K4M人工胃液中测定的释药时滞与体内的时滞接近。3.采用溶出度仪,以1%HPMC-K4M人工胃液900ml为释放介质、转速为50r/min、温度37℃±0.5℃,建立了左旋多巴漂浮型脉冲胶囊释放度改良测定方法。4.采用释放度测定法,分别考察了泡腾颗粒、乳糖颗粒作填充剂对时滞后的释药速率的影响。结果表明泡腾颗粒可显著提高左旋多巴漂浮型脉冲胶囊中主药片的释放速率。5.采用溶出度仪,以人工胃液900ml为释放介质、转速为50r/min、温度37℃±0.5℃,考察左旋多巴漂浮型脉冲胶囊中的溶蚀塞片溶蚀行为,对其溶蚀残余百分率进行方程拟合,释放机制符合Peppas方程(0.45<n=0.4634<0.89),即为扩散释放与骨架溶蚀综合作用的结果。第四部分左旋多巴漂浮型脉冲胶囊在动物体内γ-闪烁扫描示踪研究采用γ-闪烁扫描技术考察标记99mTc的左旋多巴漂浮型脉冲胶囊与参比制剂(普通明胶胶囊)在Beagle犬体内的释药和滞留情况,结果表明参比制剂在胃中15min内即释放完毕,左旋多巴漂浮型脉冲胶囊在胃中释放时滞为(479±14)min,时滞后15min内释放完毕。表明左旋多巴漂浮型脉冲胶囊的释药时滞时间达到设计要求,释药速率与参比制剂基本一致,且重现性较好。本课题根据帕金森病的时间生理学、时间药理学和时间治疗学的原理,采用溶蚀塞型定时脉冲胶囊技术结合胃漂浮技术及静水压原理,研制出符合帕金森病发病时间节律性的给药系统――左旋多巴漂浮型脉冲胶囊。该左旋多巴给药系统目前国内外尚未见报道。