类水滑石作为菠萝蛋白酶的分子容器研究及水滑石层间分子取向研究

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本文以水滑石(LDH)为前体,将其500℃焙烧的产物—复合金属氧化物(LDO)作为酶分子容器,对菠萝蛋白酶的固定、存储及固定化酶的释放进行了研究,实验结果表明,在pH值为6.5时,最优初始给酶量为每克LDO20毫升酶溶液(4mg/ml),固酶的活力表达为33.4%。由FT-IR和XRD右知菠萝蛋白酶的固定为物理吸附,对LDO的晶体结构没有产生影响,通过Langmuir、Freundilich和linear三种吸附等温模型拟和,结果表明菠萝蛋白酶在LDO表面的吸附符合Langmuir吸附等温线,相关系数(R2)为0.9946,吸附常数为0.07ml/mg,最大吸附量达到157mg/g,固定化酶的热锗存稳定性(剩余活力和热变性)比自由酶显著提高,此外,基于水滑石的“记忆效应”对固定化酶释放进行了研究。结果表明,酶的最大释放量为70%,剩余活力为81%,因此本文工作为LDO用于菠萝蛋白酶的存储和运输提供了新的研究思路。采用离子交换法制备了对硝基苯甲酸(o-NBA),萘乙酸(NAA)和荧光素(FLU)插层水滑石有机—无机复合材料,通过XRD,FT-IR等表征手段研究了插层复合物的结构,给出了o-NBA LDHs、NAA LDHs和FLU LDHs的超分子结构模型,三种客体分别以阴离子形式存在于层间,通过基于静电和氢键的主—客体相互作用,以双层倾斜的定位方式排列于主体层板间,形成稳定的超分子结构。本文首次采用荧光偏振技术对水滑石层间的对硝基苯甲酸客体取向进行了研究。采用简单的滴涂法制备了o-NBA LDHs薄膜,记录入射的激发偏振光和膜的法线方向的夹角δ所对应的激发偏振器水平、发射偏振器垂直方向的荧光强度,通过δ与二向色比率(DHV)建立的关系式,计算出对硝基苯甲酸苯环平面与LDH层板的法线方向夹角为39°。
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