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目的:目前全世界约有3.5亿慢性乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染者,约占全球人口的6%,我国作为乙肝的多发流行区,占全球HBV表面抗原总携带率的近50%,且60%的人受过HBV的感染[1]。慢性乙型肝炎是由HBV感染而致病的炎症性疾病。病发时,机体内骨髓、肝脏、淋巴结和脾脏中的巨噬细胞含量增高,淋巴组织中的B淋巴细胞和T淋巴细胞增殖分化,这些免疫细胞释放趋化因子和细胞因子,在抗病毒的同时造成局部长期的炎症反应,由此可见炎症性的免疫细胞、趋化因子和细胞因子在乙型肝炎的发生发展过程中发挥着重要的作用。 天然免疫系统要依赖模式识别受体识别入侵的外源病原微生物,然后将其清除掉。哺乳动物主要具有两类微生物识别系统,一类是膜结合受体,如Toll样受体[2],存在于细胞膜和细胞器室膜上,识别胞外微生物,然后活化细胞内信号来激发机体的免疫反应;另一类是细胞质中的模式识别受体,包括NOD样受体和具有螺旋酶结构域的抗病毒蛋白RIG-1和MDA5,在病毒感染过程中,这些分子可识别病毒的DNA或RNA,在机体抗病毒的免疫应答中发挥着十分重要的作用。本研究旨在考察表达在细胞质中模式识别受体(NOD1、NOD2、RIG1、MDA5)、Ⅰ型干扰素及促炎症细胞因子和趋化因子等在慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞和血清中的表达情况。 方法: 1收集2012年11月-2014年1月之间来河北省衡水市哈励逊国际和平医院就诊的慢性乙型肝炎患者为实验组,共计34例,收集健康人40例为实验对照组。 2采集实验组和对照组的新鲜空腹抗凝血,分离单个核细胞,提取单个核细胞中RNA,并反转录为cDNA,应用实时定量PCR技术检测NOD1、NOD2、 RIG1、MDA5、IFN-α、IFN-β、IL-8、IL-6、IRF-7、CXCL1和CXCL2的mRNA水平。 收集实验组和对照组的血清,采用ELISA法测定IL-17和IFN-α的蛋白质含量。 结果:与正常对照组比较,实验组的NOD1、NOD2、RIG1、MDA5、IRF-7、IFN-α、IFN-β、IL-8、IL-6、CXCL1、CXCL2的mRNA水平均明显升高,具有显著性差异,P<0.05。其中IFN-β的mRNA平均表达量为正常对照组的596倍,IFN-α、CXCL2、IRF-7和NOD1四项的mRNA表达水平分别为正常对照组的512倍、451倍、275倍和249倍。 与正常对照组比较,实验组的IL-17和IFN-α的蛋白质水平也明显升高,具有显著性差异,P<0.05。 结论:慢性乙肝患者的细胞质内模式识别受体NOD1、NOD2、RIG-1和MDA5,转录因子IRF7,抗病毒的细胞因子IFN-α和IFN-β,促炎症细胞因子IL-6,以及趋化因子IL-8、CXCL1和CXCL2的mRNA水平与健康人相比较,测定水平均显著升高.Th17型细胞因子IL-17和抗病毒的细胞因子IFN-α的蛋白质水平与健康人相比较,测定水平也显著升高,这些结果提示:细胞质内模式识别受体可能在慢性乙型肝炎的炎症发展过程中扮演着重要的角色。