肝癌在所有癌症的发病率中占到了5％,其死亡率在世界排名前三。肝癌病人最不良的结果是肝癌的高转移性导致其失去手术切除肿瘤的机会。肿瘤转移是一个复杂的过程并可最终导致死亡。成纤维细胞的转化是肿瘤细胞成功迁移的第一步。许多研究已经证实上皮-间质(EMT)细胞转化在肿瘤的转化及进程中发挥重要的作用。调控这一转化过程的其中一个信号通路是Wnt信号通路。激浯Wnt信号能促进增殖,上皮形态缺失和脱分化。Wnt信号在多种肿瘤,如乳腺癌、胃癌、宫颈癌等癌细胞中调节EMT的发生和发展。目前在肝癌细胞中关于Wnt与EMT的相关研究较少,并且还没有明确结论,下游调节的分子机制也不清楚。Wnt信号在肝癌EMT的发生中,要么不起作用,要么也有一定的调节方式。许多研究已证实肝细胞核因子4-alpha(HNF4a)在胚胎发育及维持成人肝细胞分化表型中发挥重要功能。下调该基因表达与肝癌发生及细胞增殖、上皮形态缺失、脱分化相关,这正与Wnt信号通路异常激活的功能一致。而我们的研究主要集中在Wnt信号诱导的肝细胞癌EMT进程是否调控HNF4a的表达。　　 本课题从分子、细胞水平上系统地研究了Wnt信号通路诱导的肝细胞癌EMT进程负调控HNF4a的分子机理。首先,我们在肝癌细胞系中转染缺失β-catenin结合位点的dnTCF验证Wnt信号与肝癌细胞EMT形态的直接调控关系,即Wnt信号减弱会导致肝癌细胞EMT表型改变,肝癌细胞由纺锤状的间充质形态向上皮质形态转化。接着,dnTCF导致的Wnt信号缺失能改变EMT标记基因E-cadherin与Vimentin的水平,并下调Wnt靶基因Axin2、Snail及Slug的水平,说明Wnt信号与肝癌细胞EMT的正相关性。再次,我们证实了在肝癌细胞系中Wnt信号诱导的EMT可负调控HNF4a;激活Wnt信号直接导致细胞内HNF4a水平的急剧下降。并通过进一步的研究发现Wnt信号主要是通过下游靶基因Snail和Slug与HNF4a启动子上的E-BOX序列结合而负调控HNF4a。最后,我们的研究还发现Wnt信号通路与HNF4a存在此升彼降、此降彼升的关系,暗示HNF4a与Wnt信号是一个双负调控环的关系。