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Ski/SnoN属于Ski原癌基因超家族,它们在细胞中的高表达可以引发细胞癌变和肌肉末端分化。Ski/SnoN是转化生长因子β超家族介导的信号通路中的重要调节因子,它们以同源或异源二聚体的形式发挥作用,其中异源二聚体的活性更高。研究发现,Ski在大鼠的闭锁卵泡中表达。目前对SnoN的研究仅仅是在原癌转化和细胞增殖等方面,而其在卵巢中的功能还不为人知。因此,本实验的目的是研究SnoN在不同发育时期卵巢中的表达情况,以此来推断其在卵泡发育及黄体化过程中的生物学功能。本文以新生小鼠和促性腺激素处理的未成熟小鼠为研究对象,观察SnoN在卵泡发育、闭锁及黄体化过程中的表达情况,进而推断SnoN在卵巢中的功能。另外,本文还对Ski在小鼠卵巢中的表达做了初步研究。
实验结果显示:在卵泡发育的早期阶段(如原始卵泡装配、原始卵泡向初级卵泡发育),SnoN在整个卵巢中均呈现阴性。SnoN的表达最早出现在出生后7天小鼠卵巢的间质细胞中。随着卵巢的发育,SnoN在间质细胞中的表达量逐渐上升。膜细胞从间质细胞中分化出来后,膜细胞中也呈现阳性表达,但是颗粒细胞中始终没有SnoN的表达。3周龄的小鼠卵巢中开始出现小、中型有腔卵泡,这类卵泡的膜细胞开始分化为内外两层,SnoN只在外膜细胞中表达,在内膜细胞中没有表达。另外,卵巢的上皮细胞中也呈现SnoN的强阳性。
在促性腺激素引起的卵泡发育过程中,卵巢中膜细胞和间质细胞中呈现强的阳性表达,而在颗粒细胞中呈现阴性。在间质细胞中,SnoN呈现持续表达,不受卵泡发育阶段的影响。SnoN在膜细胞中的表达不是均一的。在小卵泡中,SnoN只是在外膜细胞中表达,而在内膜细胞中没有,随着卵泡的发育,在大的有腔卵泡中,内外膜细胞中都呈现出阳性。在整个发育过程中,健康卵泡的颗粒细胞中始终没有SnoN的表达。在黄体形成过程中,SnoN的表达量呈明显上升。一般来讲,小鼠注射hCG后10小时发生排卵。hCG处理12小时后,即排卵之后不久,SnoN在黄体化的颗粒细胞中有表达,但是比较微弱,hCG处理48小时后,黄体中SnoN的表达呈现高的水平。TUNEL染色和免疫组织化学染色结果显示,当卵泡发生闭锁时SnoN在其颗粒细胞中呈现强阳性。