拟南芥一氧化氮相关突变体抗旱特性的鉴定

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一氧化氮(NO)是一个小的气体分子,它参与调控植物的许多生物学过程。我们在试图研究NO在植物抗旱中作用时发现植株个体的大小在植物抗旱筛选和鉴定中起着重要作用。  拟南芥noa1是一个NO合成缺陷突变体,其具个体矮小、叶片发黄等表型。有报道表明noa1较野生型Col-0抗旱。为了研究noa1个体的大小在抗旱中的作用,我们选择Col-0,noa1和gsnor1-3为材料进行同盆和异盆抗旱鉴定实验。gsnor1-3是一个亚硝基谷胱甘还原酶GSNOR1功能缺失突变体,个体大小和叶表面积与noa1相当。异盆抗旱鉴定实验中个体较小的noa1和gsnor1-3均比Col-0存活时间长;究其原因是因其蒸腾失水少而使其遭受干旱胁迫的时间较Col-0晚;当种植Col-0盆中的土壤水分因蒸腾耗尽时,种植noa1和gsnor1-3的土壤中仍有足够的水分可供利用;在个体大小相当的noa1与gsnor1-3中,noa1比gsnor1-3表现得更抗/耐旱;然而,当将这三种基因型随机种植在同一盆中时,它们几乎同时因干旱而死亡。在同盆实验中,Col-0的蒸腾作用引起的土壤水分丧失导致noa1和gsnor1-3也提前遭受干旱。在同盆实验中株型和叶表面积较大的Col-0利用了本应该被noa1或gsnor1-3植株利用的水分。在研究noa1抗旱机理时我们发现其叶片上较小的气孔密度、对ABA更敏感的气孔关闭以及更强的抗渗透胁迫能力是其较gsnor1-3更为抗旱的原因。然而,noa1和gsnor1-3离体叶片的失水率比Col-0高,这表明离体叶片的失水率可能不能代表活体植株叶片的失水率;RT-PCR结果表明,抗旱相关基因的表达在不同基因型间无明显差异。综上所述,我们的实验结果表明:1)在评价抗旱特性时应采用多种评估方法和标准,必须将不同基因型的植株个体大小因素考虑在内;2)当不同基因型的个体和叶表面积有较大差异时,需同时进行同盆和异盆实验才能筛选到真正的抗旱或耐旱基因型;当不同基因型的个体大小相似时,异盆实验更适合;3)noa1耐旱性强是因其植株较小、叶片气孔密度低、气孔关闭对ABA更敏感以及抗渗透胁迫增强等综合因素所致;4)在评估植物抗/耐旱性时,不能用离体叶片的失水率代表活体叶片的失水率,其不能作为一个评价抗旱性的指标;5)noa1的耐旱性与抗旱相关基因的表达无明显相关性。  前人关于NO在植物的生长,发育的生物与非生物胁迫中的作用进行了大量研究,但是关于NO在植物抗旱性中的作用研究甚少,我们的实验结果不仅对人们进一步认识NO在抗旱中的主要作用有重要的理论价值,而且对人们在抗旱评估时如何正确进行材料培养和取材具有重要的指导价值。
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