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目的:采集肠道疾病患者肠活检组织,采用PCR、Westernblot对人巨细胞病毒(Huamn cyto megalo virus,HCMV)感染进行检测,并结合患者临床资料分析HCMV感染与肠道疾病患者年龄、性别及肠道疾病类别的相关性;采用PCR对单纯疱疹病毒(herpes simplex virus,HSV)进行DNA检测,分析肠道疾病患者性别、年龄及肠道疾病类别与HSV感染的相关情况,以进一步了解肠道疾病中HCMV、HSV-1和HSV-2的感染与肠道疾病的相关性,特别是活动性感染与肠道疾病发生发展过程中的关系以及致病作用提供新线索。并对一例溃疡性结肠炎患者HCMV活动性感染进行确定,为进一步研究溃疡性结肠炎与活动性HCMV感染的相关性提供依据,从而有助于溃疡性结肠炎的诊断及治疗。 方法:从安徽省中医学院附属医院内镜中心采集的32份接受肠镜检查后确诊为肠道疾病的患者肠组织活检标本,进行如下处理(1)HCMV感染的病原学检测:分别采用细胞培养病毒分离法分离HCMV临床分离株;PCR检测HCMVIE-1和UL55基因;Westernblot检测其中22份活检标本HCMVIE-1、gB蛋白;记录分析结果,确定肠道活检标本HCMV活动性感染率。(2)HSV-1、HSV-2感染的DNA检测:采用PCR检测HSV-1gD基因、HSV-2gG基因,确定肠道疾病患者HSV-1、HSV-2感染率;(3)一例溃疡性结肠炎患者标本中HCMV活动性感染的确定:1)肠镜检查初步诊断为溃疡性结肠炎;2)采用HE染色对患者组织进行病理学分析;3)采用免疫组织化学检测组织中HCMVIE-1、gB蛋白;4)Westernblot检测组织蛋白中HCMVIE-1、gB蛋白的表达,从而确定HCMV活动性感染。 结果:(1)肠道活检组织HCMV感染检测结果:32份组织采用PCR检测HCMVHCMVIE-1、UL55基因均为阳性的有20份,阳性率为62.5％(20/32)。对22份组织采用Westernblot检测HCMVIE-1、gB蛋白,两者均为阳性的有5份,而活检组织中蛋白及核酸检测均为阳性的有5例。因此我们判断22例标本中HCMV活动性感染的病例共5例,活动性感染率为22.7%(5/22)。(2)肠活检组织HSV-1、HSV-2DNA检测结果:32份组织DNA采用巢氏PCR分别检测HSV-1gD基因和HSV-2gG基因,HSV-1gD基因阳性的有18份,阳性率为56.25%(18/32)。HSV-2gG基因阳性的有8份,阳性率为25%(8/32)。(3)一例溃疡性结肠炎患者HCMV活动性感染的鉴定:肠镜初步诊断此患者为溃疡性结肠炎;HE染色病理结果证实为肠炎;免疫组化检测在活检组织细胞胞核检测出HCMVIE-1蛋白,在胞浆中检测出HCMVgB蛋白;Westernblot检测发现活检组织中HCMVIE-1、gB蛋白均为阳性,提示此患者存在HCMV活动性感染。 结论:(1)32例肠道活检组织中采用PCR检测HCMVIE-1、UL55基因均为阳性的有20份,阳性率为62.5%(20/32)。其中22份组织HCMVIE-1、UL55基因和IE-1、gB蛋白均为阳性的有5份,活动性感染率为22.7%(5/22)。22份中有10份为IBD患者,10份组织中HCMV活动性感染病例为4份,感染率为40%(4/10),结果分析发现,HCMV活动性感染与IBD的发生有相关性。(2)32例肠道活检组织中HSV-1、HSV-2DNA检测发现,HSV-1gD基因阳性的有18份,阳性率为56.25%(18/32)。HSV-2gG基因阳性的有8份,阳性率为25%(8/32)。结合临床资料进行统计学分析发现,HSV-1感染与肠道息肉有相关性,而HSV-2感染与肠癌有相关性。(3)通过肠镜初步诊断,HE染色、免疫组化和Westernblot检测成功确定一例溃疡性结肠炎患者为活动性HCMV感染。