恶性脑膜瘤细胞对HER2靶向药物敏感性的研究

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目的:探讨HER2靶向药物对HER2阳性的人恶性脑膜瘤细胞增殖、侵袭及凋亡的影响,以期为脑膜瘤个体化靶向治疗提供实验依据,对治疗复发性及手术难以彻底切除的恶性脑膜瘤具有重要意义。方法:实验对象为经q PCR检验的HER2阳性表达的人恶性脑膜瘤细胞株IOMM-Lee和CH157-MN细胞株;其中前者为中度表达,后者为弱表达。将实验分为五组:空白对照组、IOMM-Lee细胞组、IOMM-Lee-Tra用药组、CH157-MN细胞组和CH157-MN-Tra用药组。对比HER2靶向药物(曲妥珠单抗)作用前后恶性脑膜瘤细胞在体内、外增殖、侵袭及凋亡的变化;采用MTT检测各组细胞增殖及体外药物敏感性;transwell侵袭小室法检测细胞侵袭能力;流式细胞术检测各组细胞凋亡情况;Western Blot检测凋亡相关蛋白Caspase-3、PARP在药物作用前后表达的变化;裸鼠成瘤实验,观察成瘤情况,并对比药物作用前后瘤体体积的变化。结果:1、HER2靶向药物作用后:a、IOMM-Lee-Tra组在体外的增殖力及侵袭力均较IOMM-Lee组降低,两者比较差异具有统计学意义;而CH157-MN-Tra组较CH157-MN组降低不明显;b、IOMM-Lee-Tra组细胞凋亡率较IOMM-Lee组高,两者差异具有统计学意义;CH157-MN-Tra组与CH157-MN组对比凋亡率差异无具有统计学意义;2、Western Blot检测药物作用后,PARP及Caspase-3蛋白在IOMM-Lee-Tra组表达均高于IOMM-Lee组,而HER2蛋白表达在IOMM-Lee-Tra组表达低于IOMM-Lee组,差异具有统计学意义;CH157-MN-Tra组与CH157-MN组比较,PARP、Caspase-3及HER2蛋白变化不明显,差异无统计学意义。3、裸鼠体内成瘤实验发现,IOMM-Lee-Tra组瘤体体积较IOMM-Lee组缩小,差异具有统计学意义;CH157-MN-Tra组与CH157-MN组变化不明显。结论:1、中度表达HER2的恶性脑膜瘤细胞IOMM-Lee对曲妥珠单抗具一定敏感性。而曲妥珠单抗作用于弱表达HER2的恶性脑膜瘤细胞CH157-MN的效果不明显。2、曲妥珠单抗可能是通过增加PARP、Caspase-3蛋白表达,降低HER2蛋白水平,从而对HER2阳性脑膜瘤细胞产生抑瘤作用。该实验数据可能为恶性脑膜瘤的临床个体化治疗提供实验依据。
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