在哺乳动物上,植物甾醇具有降低血浆胆固醇含量、抗氧化应激、促进生长、抗癌等作用。植物甾醇若作为一种蛋鸡的功能性饲料添加剂,其安全性评价和对胆固醇代谢的影响尚不明确。因此,本实验旨在探讨蛋鸡饲料中添加植物甾醇的安全性,并研究其对蛋鸡胆固醇代谢的影响。1饲料中添加不同剂量植物甾醇的安全性评价根据农业部饲料添加剂安全性评估方法设置有效剂量组(20 mg/kg组)、4倍剂量组(80 mg/kg组)、20倍剂量组(400 mg/kg组)和40倍剂量组(800 mg/kg组)。选取540羽25周龄海兰褐蛋鸡,分为5个组,每个组6个重复,每个重复18羽。对照组为基础日粮组,试验组分别为在基础日粮基础上添加20 mg/kg、80 mg/kg、400 mg/kg、800 mg/kg剂量的植物甾醇,预饲期7天,试验期为70天。与对照组相比,添加植物甾醇对蛋鸡前五周的蛋均重、产蛋率及料蛋比均无显著影响。试验结束时,试验组蛋均重、产蛋率及料蛋比与对照组相比也没有显著影响。添加不同剂量的植物甾醇对蛋鸡心脏、肝脏、脾脏、肺脏和胃的脏器指数并无显著性的影响,但是,400 mg/kg组比80 mg/kg组肝脏的脏器指数显著降低。与对照组相比,植物甾醇添加对蛋鸡血浆抗氧化性能并无显著影响,仅800 mg/kg植物甾醇添加后有降低蛋鸡血浆丙二醛含量的趋势(P=0.098)。但在各试验组间,不同水平植物甾醇添加影响了蛋鸡血浆抗氧化酶水平,与20 mg/kg植物甾醇组相比,800 mg/kg蛋鸡血浆T-AOC水平显著下降(P<0.05)；与400 mg/kg植物甾醇组相比,800 mg/kg蛋鸡血浆SOD水平显著升高(P<0.05)。组织病理切片观测结果显示日粮中添加植物甾醇未对蛋鸡心脏、肝脏及脾脏等主要脏器造成病理性改变。从生产性能、脏器指数、血浆抗氧化指标以及组织病理切片四个方面验证了蛋鸡饲料中添加植物甾醇的安全性。2饲料中添加植物甾醇对蛋鸡胆固醇代谢的影响在哺乳动物中,植物甾醇降胆固醇作用的研究很多,但是其在禽类中应用的研究一直存在争议,并且机制尚不明确。为了研究植物甾醇是否能降低产蛋鸡的胆固醇以及其作用机制,我们检测了植物甾醇对血浆生化指标、蛋黄胆固醇、肝脏和小肠中胆固醇含量及胆固醇代谢相关基因表达的影响。结果表明,试验第五周时,饲粮中添加植物甾醇显著提高了蛋鸡血浆总胆固醇、甘油三酯及极低密度脂蛋白的含量(P<0.05),其中400 mg/kg或800 mg/kg植物甾醇的添加显著增加了蛋鸡血浆低密度脂蛋白胆固醇水平(P<0.05)。试验结束时,20 mg/kg或80 mg/kg植物甾醇的添加显著增加了蛋鸡血浆高密度脂蛋白胆固醇水平(P<0.05)。与对照组相比,400 mg/kg组和800 mg/kg组蛋鸡肝脏、回肠和十二指肠的胆固醇含量显著升高(P<0.05)；空肠800 mg/kg组的胆固醇含量极显著升高(P<0.01)。与对照组相比,饲粮中添加植物甾醇并未对蛋黄胆固醇的含量产生显著性的影响。本试验采用实时荧光RT-PCR定量检测了添加800 mg/kg植物甾醇之后肝脏和小肠胆固醇代谢相关基因mRNA表达的变化。结果显示,饲料中添加800 mg/kg的植物甾醇对肝脏中的胆固醇-7α-羟化酶(cholesterol-7alpha-hydroxylase, CYP7A1)、低密度脂蛋白受体(low density lipoprotein receptor, LDLR)、固醇调节元件结合蛋白(sterol regulator element-binding protein 2, SREBP-2)、载脂蛋白B (apolipoprotein B, apoB)、腺苷三磷酸结合盒转运体(ATP-binding cassette transporter, ABC)、肝X受体(liver X receptor, LXR)、酰基辅酶A：胆固醇酰基转移酶1 (acyl-coenzyme A cholesterol acyltransferase 1, AC AT1)、3-羟-3-甲基戊二酸单酰CoA还原酶(3-Hydroxy-3-methylglutaryl coenzyme A reductase, HMGR)的mRNA水平均无显著性影响；对十二指肠、空肠和回肠中的HMGR、ABCG5、ABCG8、ACAT2、LDLR和LXR的mRNA水平均无显著性影响。