荧光定量PCR在子宫内膜结核诊断中的临床意义

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目的:子宫内膜结核是由结核杆菌引起的子宫内膜炎症,感染的主要来源是肺或腹膜结核。原发病灶大多数在肺、胸膜,潜伏期长达数年,因此,当发现子宫内膜结核时,原发病灶可能已消失;子宫内膜结核在生殖器官结核中占50%~60%,常常是由输卵管结核蔓延扩展到子宫,病变多局限在子宫内膜,严重时可以侵犯子宫肌层。子宫内膜结核一直以来依赖临床表现和实验室常规监测及X线检查,甚至因不孕进行各种排查才能诊断。这对于需早期有效治疗的可疑病人的快速诊断是困难的,随着结核基因组研究的不断深入,分子生物学技术逐渐应用于临床。荧光定量PCR技术问世,国内首先报道应用此方法检测肿瘤患者和健康体检者CK19、C-ERBB2,的水平。此技术作为病原体检测方法积累了大量关于病原体核酸量与感染性疾病发生、发展和预后之间关系的资料,将形成感染性疾病的临床分子诊断标准。国内关于应用检测PCR技术检测肺结核、支气管内膜结核、乙肝、HIV已有文献报道,但是关于应用荧光定量PCR技术对子宫内膜结核的结核杆菌检测并进行疗效观察报道较少。本研究通过三种方法比较,观察荧光定量PCR技术在子宫内膜结核诊断中的作用。  方法:病例选择:选取2008年10月至2011年6月到河北省胸科医院妇科就诊的120例患者,其中以病理确诊子宫内膜结核患者88例为病例组。年龄为20-53岁,中位数年龄为30岁,其中21-30岁45例,31-40岁20例,41-45岁18例,45岁以上5例。另外以病理排除子宫内膜结核且无其他部位结核的患者32例为对照组。  通过诊断性刮宫、宫腔镜采集标本,以组织病理学为标准,应用荧光定量PCR、抗酸染色、结核菌培养三种方法检测。标本采集时间:患者中有月经来潮者93例,取分泌晚期子宫内膜(月经来潮12小时内诊刮),对月经稀少18例和闭经患者9例,采用宫腔镜下采集标本。结核菌培养应用新鲜组织,荧光定量PCR、抗酸染色、病理为石蜡切片。  统计学处理:所有数据采用SPSS13.0统计学软件进行统计学处理:计数资料采用卡方检验,计量资料采用配对秩和检验,按α=0.05水准,P<0.05,有统计学意义。  结果:病例组患者88例,21-30岁占51.14%,31-40岁占22.72%,40岁以上占23.14%,生育年龄(20-40岁)占为73.86%;不孕者为92.04%,合并肺及其他部位占63.64%,有结核接触史者占23.86%。  应用荧光定量PCR方法、抗酸染色法、结核分枝杆菌培养法三种方法检测灵敏度分别为:76.14%,51.13%,73.86%,假阴性率分别为:23.87%、48.87%、26.14%。  对照组患者32例,应用荧光定量PCR方法、抗酸染色法结核、分枝杆菌培养法三种方法检测特异度分别为84.38%、59.37%、93.75%,假阳性率15.62%、40.63%、6.25%。  荧光定量PCR方法、抗酸染色法、结核菌培养方法(平均检测时间)三种检测方法需要时间分别为:21小时、22小时、621.84小时。  结论:荧光定量PCR法检测灵敏度、特异度明显高于抗酸染色法,假阳性、假阴性率明显降低抗酸染色法,表明荧光定量PCR是子宫内膜结核的诊断标准之一。  荧光定量PCR与结核分枝杆菌培养法比较所用时间明显缩短,因此荧光定量PCR对子宫内膜结核的及时诊断有重要意义。  荧光定量PCR检测需要时间短,且准确率高,操作简便,可作为诊断子宫内膜结核的一种可靠方法。  
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