家蚕幼虫中肠蛋白质组学分析

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家蚕(Bombyx mori)是拥有良好饲养体系的植食性昆虫。遗传资源丰富,个体相对较大,是鳞翅目害虫的研究模型。2004年家蚕基因组测序的完成并结合家蚕的EST序列的基础上得以构建家蚕蛋白质理论数据库,为家蚕蛋白质组学研究奠定了基础。家蚕是全变态昆虫,经历了四个不同的发育时期:卵,幼虫,蛹和成虫。在家蚕的发育过程中,幼虫期是家蚕整个生命周期中的唯一取食阶段。在这个阶段中,五龄幼虫期是积累营养物质最多的时期,对生长,发育以及产丝极为重要。家蚕中肠是食物消化,营养物质吸收的主要器官,同时也是抵御外来物质的一道天然屏障,是研究昆虫防御系统的靶标器官之一。饥饿对昆虫产生的压力会影响其行为,发育,寿命,繁殖以及代谢,甚至是会导致昆虫的死亡。而中肠组织作为食物的消化吸收的主要器官是在饥饿处理条件下受到最直接影响的器官之一,因此在饥饿处理条件下对家蚕幼虫期中肠组织蛋白质组学的研究具有重要的意义。为了了解家蚕五龄幼虫期中肠的蛋白图谱以及在饥饿处理条件下中肠蛋白质的变化,我们利用双向电泳和基质辅助激光解析电离化/飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术分析了家蚕正常饲喂以及饥饿条件下五龄幼虫中肠组织蛋白质的变化情况。主要获得了如下结果:1.通过双向电泳及质谱技术我们共鉴定得到了96个中肠蛋白质,其中69个蛋白质是首次在家蚕中肠中得到鉴定。2.中肠蛋白点的数目随发育变化而逐渐增多,这些蛋白大部分分布在30到90kDa的高等电点区域。3. 10kDa热激蛋白和滞育激素前体只在饥饿处理的家蚕中肠中得到鉴定。推测家蚕饥饿诱导表达这两种蛋白以此来增加家蚕在饥饿环境中的适应能力。
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