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目的：探讨NANOG基因在人急性髓系白血病(AML)、急性淋巴细胞白血病(ALL)细胞中的表达及该基因对细胞干性或生物学行为的影响和可能机制。方法：(1)利用RT-PCR及Western blot技术检测多种急性白血病细胞系及患者骨髓细胞中NANOG的表达情况。通过构建携带NANOG特异性shRNA的慢病毒载体包装病毒颗粒,感染急性白血病细胞后经分选获得稳定表达株,并在基因及蛋白水平检测了NANOG干扰效率。(2)用CCK-8法、流式细胞仪、甲基纤维素集落培养等检测干扰NANOG前后对U937、THP-1细胞增殖、凋亡、克隆形成能力的影响。利用裸鼠皮下移植模型检测干扰NANOG前后对U937细胞成瘤能力的影响。利用实时定量PCR及Western blot技术检测下调NANOG基因对BMI1表达的影响,构建稳定下调BMI1表达或同时过表达NANOGP8的U937细胞,通过检测细胞的增殖、凋亡、克隆形成能力的变化验证两者的相互关系。利用双荧光素酶报告基因系统证实NANOGP8激活BMI1表达的分子机制。(3)用CCK-8法、流式细胞仪等检测干扰NANOG前后对MOLT-4细胞增殖、凋亡、细胞周期的影响。利用基因芯片技术比较NANOG干扰前后MOLT-4细胞的基因表达变化,寻找可能的作用通路,并经实时定量PCR技术证实。结果：(1)多种急性白血病细胞表达NANOGP8基因和蛋白。构建的干扰NANOGP8的慢病毒颗粒感染白血病细胞后可有效下调NANOGP8基因及蛋白的表达。(2)在U937、THP-1细胞中下调NANOGP8的表达可明显抑制细胞的增殖,且呈时间依赖性。感染shNANOG-1或shNANOG-2慢病毒的U937.THP-1细胞其凋亡细胞比例较sh-control组明显升高(P<0.05),而细胞集落形成数较sh-control组明显减少(P<0.05)。裸鼠皮下移植模型显示接种shNANOG-1感染的U937细胞其瘤体重量和体积均较sh-control组明显减少(P<0.05)。进一步检测发现抑制U937细胞中NANOGP8的表达可同时下调BMI1的表达,但下调BMI1的表达不影响NANOGP8的表达。下调BMI1或NANOGP8的表达均可抑制U937细胞的增殖、克隆形成能力并促进细胞凋亡,在下调BMI1的同时高表达NANOGP8不能纠正以上影响。通过双荧光素酶报告基因系统证实NANOGP8可通过结合BMI1基因启动子-220～-210区域激活基因的转录。(3)在MOLT-4细胞中下调NANOGP8的表达可明显抑制细胞的增殖,且呈时间依赖性。感染shNANOG-1或shNANOG-2慢病毒的MOLT-4细胞其凋亡细胞比例较sh-control组明显升高(P<0.05),且G0/G1期细胞比例较sh-control组明显增高(P<0.05)。基因芯片技术显示下调MOLT-4细胞中NANOGP8的表达可引起多条通路基因的表达变化,其中富集积分较高的共有通路为P53信号通路,实时定量PCR法证实shNANOG-1组细胞中TP53、CDKN1A、CDKN2A及CYCS基因表达较sh-control组显著升高(P<0.05),而MDM2及CCND1基因表达则明显下降(P<0.05)。结论：(1)在AML、T-ALL细胞系及患者白血病细胞中均存在NANOGP8的表达。(2)下调AML细胞中的NANOGP8的表达可使细胞增殖减缓、凋亡增加、克隆形成能力及成瘤能力减弱。NANOGP8可通过结合BMI1基因启动子区域激活基因的转录,并参与了对AML细胞干性的调控。(3)下调T-ALL细胞中的NANOGP8的表达可使细胞增殖减缓、凋亡增加、细胞阻滞于G0/G1期。NANOGP8可通过P53依赖的信号通路参与T-ALL细胞生物学行为的调控。