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目的:细胞因子尤其是趋化因子吸引单核-巨噬细胞等进入肾小球系膜区和肾小管间质是始动糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)的早期事件,而基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)是重要的细胞外基质(extracellular matrix,ECM)降解酶,主要参与Ⅳ型胶原的降解,与DN的关系非常密切。MMP-2能否影响人肾小球系膜细胞(Human Renal mesangial cells,HRMCs)Fractalkine(CX3CL1,Fkn)及单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的产生尚未明确。因此,本研究旨在观察重组MMP-2干预后的HRMCs对人单核细胞株U937细胞趋化和黏附功能的影响,并探讨其在DN发病机制中的可能作用。
方法:体外培养后,换用无血清的RPM11640培养液同步化饥饿24h后,用重组MMP-2干预HRMCs。用Transwell小室装置检测趋化单核细胞的功能,用荧光染色法检测HRMCs黏附单核细胞的功能；用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测Fkn mRNA与MCP-1 mRNA的表达,Western blot法检测Fkn与MCP-1蛋白的表达,ELISA法检测HRMCs干预上清液中Fkn与MCP-1蛋白含量。
结果:1.MMP-2组HRMCs趋化单核细胞数高于空白组(P<0.05)。2.MMP-2组HRMCs黏附单核细胞数低于空白组(P<0.05)。3.MMP-2干预HRMCs后Fkn与MCP-1mRNA的表达量高于空白对照组(P<0.05)。4.MMP-2干预HRMCs后Fkn与MCP-1蛋白的表达量高于空白对照组(P<0.05)。5.MMP-2干预HRMCs后上清液中Fkn与MCP-1的浓度较空白对照组显著降低(P<0.01)。
结论:1.MMP-2可增加HRMCs的Fkn与MCP-1的mRNA表达。2.MMP-2可增加HRMCs的Fkn与MCP-1的蛋白表达。3.MMP-2可下调干预上清中Fkn与MCP-1的蛋白含量。4.MMP-2可增强HRMCs趋化单核细胞的功能,下调HRMCs黏附单核细胞的功能。