石榴籽多糖的提取分离及降糖饮料的初步开发

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石榴(Punica granatum L.)是落叶乔木或灌木,为石榴属植物,在温带及亚热带地区分布较为广泛。石榴除了有食用价值外,还有药用价值。它的果皮、籽、叶子和花等具有多种生理功效,所以在很多药用配方中都有使用。其中石榴籽占比重较大,约为石榴总重的12%左右,但由于人们对石榴籽的利用价值认识不够充分,石榴籽资源的潜力没有得到相应的挖掘,所以需要进一步加深对石榴籽活性成分和药理作用的研究力度。鉴于之前已发现的具有降血糖效果的多种植物性多糖并结合前人的研究成果,本课题采用水提法提取石榴籽多糖,利用石榴籽多糖对α.葡萄糖苷酶活性的影响体外研究其降血糖效果,采用超滤法和DEAE-52纤维素柱层析对石榴籽多糖中的活性成分进行纯化筛选,并利用石榴籽水提物初步开发了一种降糖饮料,研究了该饮料对糖尿病小鼠体重和血糖水平的影响。主要研究结果如下:(1)确定提取石榴籽多糖的最佳提取工艺。提取石榴籽多糖时采用了传统热水浸提和超声辅助提取法,并通过设计正交实验确定最佳工艺条件。传统法的优化工艺:固液比、提取温度和时间分别是1:30、70℃和100 min,多糖得率为26.51mg/g。超声法的优化工艺:固液比、提取温度、时间和功率分别是1:40、50℃、30min和250W,多糖得率为26.58 mg/g。(2)对粗多糖进行分离纯化。采用Sevage法和活性炭对粗多糖脱蛋白和脱色,经超滤分离后得到三个分子量级的组分PSP-A、PSP-B、PSP-C,其中组分PSP-C的抑酶率高达51.41%,具有最好的体外降糖效果。采用DEAE-52纤维素柱层析对PSP-C分离纯化得到两个组分PSP-C.1和PSP-C-2,抑酶率分别为13.07%和59.5%。对活性组分PSP-C-2在190-600 nm内进行紫外扫描,发现在280 nm和260 nm附近没有出现明显吸收峰,说明PSP-C-2中基本不含有蛋白和核酸。(3)研究降糖饮料的工艺配方。通过感官评分及抑酶率确定石榴籽水提物的添加量,根据正交实验得出了降糖饮料的最优配方,柠檬酸、木糖醇、p-CD的添加量分别为0.05%、7%和0.2%。添加0.2%的琼脂时,饮料的稳定性最好。研究发现pH值过低时不能达到较好的降糖效果,应控制柠檬酸的添加量。通过研究不同的灭菌条件对饮料体外降血糖效果的影响确定最佳的灭菌方式为100℃灭菌10mm。(4)验证饮料的体内降糖效果。降糖饮料不会对正常小鼠血糖值造成明显影响,却能明显改变糖尿病小鼠的体重和血糖值,对“三多一少”症状有一定缓解。
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