淋巴细胞是人体发挥免疫功能的重要组分,尤其在儿童抗感染免疫中发挥着重要作用,是防卫病原体入侵最有效的武器。根据其生物功能和细胞表面抗原表达情况分为T淋巴细胞(T-cell,CD3+)、B淋巴细胞(B-cell,CD3-CD19+)和NK细胞(NK-cell,CD3-CD16+CD56+),成熟T细胞根据细胞表面CD4和CD8表达不同,分为CD4+T细胞(Th,CD3+CD4+)和CD8+T细胞(Tc,CD3+CD8+)。淋巴细胞亚群分析是判断机体细胞免疫和体液免疫水平的重要指标,它能反映机体当前的免疫状态及平衡情况。参考区间又称参考范围,是临床医生对患者或健康体检者的检验结果做出准确判断最主要的依据。目前国内仅有少量健康个体的淋巴细胞亚群分布变化研究,而文献明确表明淋巴细胞亚群不但随年龄而变化,还受生态环境、社会经济等多种因素的影响,即不同地区、不同种族之间亦存在差异。至本研究开题时按照规范建立适合于中国人群外周血淋巴细胞亚群的参考区间未见报道,尤其是针对7岁以下儿童的参考区间,绝大多数临床实验室均是使用国外诊断试剂说明书提供的淋巴细胞亚群参考区间出具检验报告单。因此,为提高临床实验室在此方面的服务水平,迫切需要建立适合我国儿童年龄、性别及地域等因素相关的淋巴细胞亚群参考区间。目的本研究以河南省7岁以下健康儿童作为研究对象,采用流式细胞术双平台法,根据ws/t402-2012《临床实验室检验项目参考区间的制定》规范要求,建立河南省7岁以下儿童年龄和性别相关的淋巴细胞亚群的参考区间。将自建参考区间应用于下呼吸道感染性疾病患儿,分析其免疫水平的改变。方法1.研究对象及分组:河南省7岁以下健康儿童分为7组,分别为:0~1岁;1~2岁;2~3岁;3~4岁;4~5岁;5~6岁;6~7岁。另,选取3岁以下支气管炎(111例)、支气管肺炎(418例)和毛细支气管炎患儿(83例),分析其免疫水平的改变。2.流式细胞仪检测受试者儿童外周血淋巴细胞亚群相对计数,血细胞计数仪检测受试者儿童外周血细胞计数。结果1.不同年龄组间比较,除女童tc细胞相对计数和男童nk绝对计数外,t淋巴细胞、th细胞、tc细胞、b淋巴细胞及nk细胞差异均有统计学意义(p=0.001,0.001,0.001,0.001,0.001)。2.性别比较在仅少数年龄组间差异有统计学意义(p<0.05)。3.t淋巴细胞、tc细胞及nk细胞相对计数随年龄逐渐升高,th细胞、b淋巴细胞相对计数及cd4/cd8随年龄逐渐降低趋势,淋巴细胞亚群各项绝对计数均随年龄逐渐降低。4.同香港、美国、喀麦隆和意大利已发表的研究进行比较,显示自建儿童淋巴细胞亚群参考区间与上述研究相比,淋巴细胞亚群相对计数和绝对计数分布明显不同。5.将参考区间应用于下呼吸道感染性疾病患儿,显示患儿存在不同程度的细胞免疫功能低下或紊乱、以及体液免疫功能亢进。本研究按照《临床实验室检验项目参考区间的制定》的标准,建立了年龄和性别相关的淋巴细胞亚群相对计数和绝对计数的参考区间。自建参考区间经验证适用于本地区儿童,有助于疾病的诊断。