论文部分内容阅读
目的缺血性卒中以其高发病率、高致残率、高致死率、高复发率,严重地威胁着人类的健康,与之相关的神经康复问题一直是人们关注的焦点和研究的难点。因大量中枢神经再生抑制因子的存在,如:Nogo-A、髓鞘相关糖蛋白(MAG)、少突胶质细胞-髓鞘糖蛋白(OMGp)等,导致中枢神经再生极为困难。研究发现[1,2]:在一些干预因素下,遭受缺血缺氧或机械损害的神经元轴突却可以再生,并促进原受损轴突支配区功能的恢复。RGMa(repulsive guidance molecule a, RGMa)作为轴突的一种排斥性导向分子,是一种新的轴突再生抑制因子;研究表明[3]:大鼠脊髓半切术后,鞘内注射RGMa抗体,可显著增加轴突延长并促进神经功能康复。作为内源性再生相关因子生长相关蛋白-43(growth associated protein-43,GAP43),在中枢神经系统发育和可塑性的重建过程中发挥着重要作用[4-5],众所周知运动锻炼可以促进功能康复,为此本研究通过研究运动锻炼对局灶性脑缺血大鼠RGMa与GAP43表达以及神经功能的影响,初步探讨运动锻炼与轴突再生抑制因子的关系,为运动锻炼促进神经康复的机制阐明,以及临床脑缺血患者运动康复,提供理论依据.方法1. SD大鼠(n=120)随机分为正常组、假手术组、MCAo/再灌注模型7天、14天、28天组,以上各组再分为非运动、低运动量、中运动量、高运动量锻炼组。各组予以神经功能评分,后用免疫荧光定量PCR和免疫组化检测缺血侧皮质和海马区RGMa mRNA和蛋白表达情况。2.成年健康雄性SD大鼠60只,随机分为5组,正常组、假手术组(n=12)、MCAo/再灌注模型7天、14天、28天组,以上各组再随机分为非运动、低运动量、中动量、高动量组,每组各12只。各组予以免疫组化检测缺血侧脑皮质和海马区GAP-43表达情况。结果1.在MCAo 7天、14天、28天非运动组,大鼠缺血侧海马和皮质RGMa相对表达量与正常非运动组、假手术非运动组比,显著增加(p<0.05),随时间延长,模型各非运动组表达逐渐降低。低运动量模型各组与对应非运动模型组比较无显著性差异(p>0.05)。中运动量模型14天、28天组与对应各非运动模型组比较,前者表达量明显下降(p<0.05);但中运动量模型7天组RGMa mRNA表达量与对应非运动模型组相比无显著性差异(p>0.05)。2.大鼠缺血侧脑皮质和海马区中运动量14天、28天组与对应时间点各非运动组相比,前者RGMa蛋白表达明显下降(p<0.05),但中运动量模型7天组RGMa蛋白表达量与对应时间点非运动模型组比无显著性差异(p>0.05)。高运动量模型组RGMa蛋白表达较对应各时间点非运动模型组增高(p<0.05),低运动量模型组与非运动模型组相比, RGMa蛋白的表达未见明显差异(p>0.05)。神经功能评分显示中运动量模型各组明显改善神经功能(p<0.05),低运动量模型各组未见明显功能改善(p>0.05),高运动量模型各组有损害功能康复趋势(p<0.05)。3.大鼠缺血侧脑皮质和海马区GAP-43在7天时表达最高;MCAo/再灌注模型7天、14天、28天低运动量组与对应时间点各非运动组相比,GAP-43表达无显著性差异(p>0.05)。中运动量MCAo/再灌注模型14天、28天组与对应时间点各非运动组相比, GAP-43表达显著增加(p<0.05),但中运动量MCAO/再灌注模型7天组GAP-43表达量与对应非运动模型组相比无显著性差异(p>0.05),高运动量模型各组与对应时间点各非运动模型组相比,高运动量组GAP-43表达明显下降(p<0.05)。结论适量运动锻炼可以降低大鼠缺血侧大脑皮质和海马区RGMa mRNA和蛋白表达;适量运动锻炼可以增加大鼠缺血侧脑皮质和海马区GAP-43表达;适量运动锻炼促进脑缺血大鼠神经功能康复,可能与这些中枢神经系统轴突再生相关因子的表达变化有关。