【摘 要】
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目的:探讨Notch2基因在胰腺癌细胞BXPC-3侵袭转移中的作用及机制,以期为临床上胰腺癌的分子靶向治疗提供参考。方法:本研究利用小RNA干扰技术沉默胰腺癌细胞中Notch2基因的表达
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目的:探讨Notch2基因在胰腺癌细胞BXPC-3侵袭转移中的作用及机制,以期为临床上胰腺癌的分子靶向治疗提供参考。方法:本研究利用小RNA干扰技术沉默胰腺癌细胞中Notch2基因的表达,建模成功后采用逆转录聚合酶链反应(实时RT-PCR)和蛋白免疫印记(Western Blot)方法检测该细胞中Notch2基因的沉默效率,在成功抑制Notch2基因后,以Transwell实验对处理后的胰腺癌细胞进行迁移及侵袭能力的检测,用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐比色试验(MTT实验)检测细胞的增殖能力,并采用RT-PCR和Western Blot方法检测与肿瘤细胞远处侵袭转移能力密切相关的基质金属蛋白酶-9(MMP9)的表达关系。结果:胰腺癌细胞BXPC-3中的Notch2基因被siRNA成功抑制后,通过qRT-PCR检测发现,Notch2基因的表达效率显著下降(100.00%±8.62%VS12.28%±2.76%,P<0.01),胰腺癌细胞的增殖能力明显降低(100.00%±9.22%VS48.35%±7.13%,P<0.05)。通过蛋白水平的研究我们发现,siRNA转染后对Notch2蛋白表达的抑制效果明显(100.00%±11.18%VS32.61%±6.73%,P<0.05),癌细胞的迁移能力(100.00%±19.32%VS63.85%±9.98%,P<0.05)、侵袭能力(100.00%±18.15%VS53.63%±10.76%,P<0.05)及与胰腺癌侵袭转移能力密切相关的MMP9蛋白的表达(0.38fold, P<0.05)均出现了很大程度的降低。结论:Notch2可能通过调节MMP9的表达来调控胰腺癌细胞BXPC-3的侵袭转移能力。
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