随着社会经济、交通的迅猛发展，颅脑创伤（Traumatic Brain Injury,TBI）的发生频率逐年增加，极大地威胁人类的生命健康。颅脑创伤的患者大多数为青壮年，严重影响社会劳动力，给社会和家庭带来沉重的经济、精神负担。颅脑创伤救治水平的不断提高，人们越来越重视颅脑创伤合并伤的治疗，以降低其死亡率和致残率，提高患者生活质量。创伤性视神经损伤(traumatic opticneuropathy，TON)在颅脑损伤患者中发病率约为0.5％～5％。视神经作为中枢神经系统的一部分(central nervous system, CNS)，因为对损伤非常敏感，并且缺乏雪旺氏细胞，自我修复能力较差，是颅脑外伤致残率较高的一个重要原因。视神经损伤患者通常出现视力减退甚至失明，严重影响患者的生活、工作、学习等。创伤性视神经损伤的临床救治尚无统一、疗效确切的治疗规范，是当今医学界研究的热点及难点。本课题以急性视神经损伤为研究对象，重点研究视神经损伤的病理生理变化及骨髓间充质干细胞的神经修复功能，主要分为以下五个部分分别进行基础研究和临床观察。目的：成功建立视神经钳夹损伤动物模型，研究急性视神经损伤后视网膜神经节细胞（RGCs）的凋亡的动态变化，探讨GFAP在急性视神经损伤中的作用机理，为创伤性视神经损伤的临床治疗和预后判断提供实验依据。方法：应用外科手术显微镜，经眼入路，充分暴露视神经，使用20g动脉瘤夹夹伤成年SD大鼠视神经9s，共40只，致伤侧作为实验致伤组，对侧为自身对照组。20只成年SD大鼠随机分为4组即正常组、损伤1w组，损伤2w组和损伤4w组。每只实验大鼠均进行术前术后瞳孔直径及对光反射检测和手术前后闪光视觉诱发电位（F-VEP）的测定，观察波峰振幅和潜伏期。各组动物灌注固定后取视神经和视网膜，行RGCs计数、HE染色和免疫组化检查。结果：1、致伤组瞳孔直径平均为3.05±0.32mm，直接光反射消失、间接光反射灵敏；对照组为0.73±0.12mm，直接光反射灵敏、间接光反射消失。2、损伤后1w的HE染色，仅见少量炎性细胞，2w可见炎性细胞和少量血管增生，4w可见大量炎性细胞浸润以及新生血管。3、损伤后3d，RGCs无明显变化，损伤后3d，1、2、4w，RGCs数量明显下降（p<0.05），分别下降约5.13%、27.88%、43.91%、60.58%。4、致伤后，损伤区域GFAP逐渐减退；损伤周围表达量增加，致伤后2w到达高峰，然后逐渐下降。结论：视神经钳夹损伤模型稳定性高、易操作、重复性好，可在实验室内完成；此模型能够有效的模拟临床上创伤性视神经损伤的病理生理变化和临床症状。目的：分离、纯化、培养骨髓间充质干细胞并予以鉴定；构建骨髓间充质干细胞植入支架。方法：1、取大鼠股骨，使用PBS冲洗出骨髓，离心并使用贴壁筛选法分离纯化骨髓间充质干细胞，并将其传代培养。运用流式细胞仪检测骨髓间充质干细胞的阳性标志CD44、CD105，阴性标志CD45、CD34，以鉴定骨髓间充质干细胞的纯度；2、以人工合成胶原蛋白为原料制作视神经鞘管，孔隙大约为150μm。细胞传代后，将视神经鞘管放入细胞悬液中培养24h后激光共聚焦观察。结果：1、骨髓间充质干细胞易于传代培养，流式细胞仪检测的结果，CD44、CD105、CD45、CD34分别为91.23±2.1%、85.77±3.1%、1.25±1.1%、0.78±0.3%；2、激光共聚焦显示视神经鞘管上满布骨髓间充质干细胞。结论：运用大鼠骨髓腔易提取骨髓间充质干细胞，且其纯度较高；以视神经鞘管为基础，成功制备植入支架，能够生长大量骨髓间充质干细胞。目的：探讨骨髓间充质干细胞对视神经损伤视网膜节细胞的影响，以及其RGCs的动态变化。方法：以大鼠视神经钳夹伤模型为实验对象，随机分为骨髓间充质干细胞治疗组、磷酸缓冲液（PBS）治疗对照组和空白对照组（损伤后不予以治疗），每组各20只。视神经损伤后3d分别植入富含骨髓间充质干细胞或者磷酸缓冲液的视神经鞘管于损伤部位。治疗后3d、1w、2w、4w，取材行RGCs计数并比较三组之间差异。结果：1、骨髓间充质干细胞治疗组中分别在治疗后3d、1w、2w、4w（4个亚组）取材，进行RGCs计数，RGCs计数分别为242±9、225±6、208±11、138±12；磷酸缓冲液（PBS）治疗对照组的4个亚组的RGCs计数分别为238±12、198±11、166±9、131±12；空白对照组分别为225±12、201±10、176±6、121±6。2、磷酸缓冲液组与空白对照组之间各亚组之间的RGCs的计数均无明显差异。3、骨髓间充质干细胞治疗组和磷酸缓冲液治疗组或空白对照组之间，在治疗后3d和4w，在RGCs计数方面无明显差异；在治疗后1w和2w，在RGCs计数方面存在差异，P<0.05。结论：骨髓间充质干细胞的移植可以减缓视网膜节细胞的凋亡，具有一定RGCs目的：探讨骨髓间充质干细胞对视神经损伤病理结构的影响，及其相关影响因素。方法：以成功建立的大鼠视神经钳夹伤模型和骨髓间充质干细胞支架为基础，把成年SD大鼠随机分为骨髓间充质干细胞治疗组、磷酸缓冲液（PBS）治疗对照组和空白对照组（损伤后不予以治疗），每组各20只。视神经损伤后3d分别植入富含骨髓间充质干细胞或者磷酸缓冲液的视神经鞘管于损伤部位。治疗后3d、1w、2w、4w取材行免疫组化（GFAP）、透射电镜检测并比较三组之间差异。运用PTEN、P-EGFR抗体，分别对正常、损伤后1w、损伤1w后治疗的大鼠进行免疫组化检测。结果：1、骨髓间充质干细胞治疗组中分别在治疗后3d、1w、2w、4w（4个亚组）取材检测，损伤区域及周围均出现GFAP的表达量逐渐增加，治疗后2w到达高峰，4w后基本无表达；磷酸缓冲液治疗与空白对照组GFAP的表达无明显差异，免疫组化显示损伤区域无表达，损伤周围随着时间的推移表达量逐渐增加，至2w到达高峰，4w后表达阴性；2、PTEN：在视神经和视网膜节细胞均可表达，正常组低表达，损伤组高表达，治疗组低表达；P-EGFR：正常阴性，致伤后损伤区域低表达、周围高表达，治疗后损伤区域表达增加。3、透射电镜显示各亚组，随着时间的推移，正常轴突数目逐渐减少，髓板愈加松散，脱髓鞘明显。透射电镜显示治疗后3d损伤区域可见轻度脱髓鞘，髓板轻度松散，随着时间的推移，出现明显的脱髓鞘病变，髓鞘泡状分离，线粒体肿胀、溶解，板层分离等，至4w，出现更加明显的髓鞘崩解。结论：骨髓间充质干细胞的移植具有一定的神经保护作用，延缓脱髓鞘病变，并且有利于视神经髓鞘的修复。目的：分析创伤性视神经损伤的手术治疗和保守治疗的效果，探讨创伤性视神经损伤的临床治疗方法，并进一步探讨创伤性视神经损伤的手术技巧和预后情况。方法：回顾性分析本人在上海市长征医院神经外科学习期间参与诊治的4例（5只眼）创伤性视神经损伤患者的临床资料，平均随访6个月（3个月-2年）。结果：病例一：男，52岁，车祸至头部外伤，左眼仅有光感，眼眶CT（平扫）提示双侧眼视神经管骨折，骨折片压迫视神经。入院后5日全麻下经额外侧入路行左侧视神经管减压手术，随访至第六个月患者左眼视力恢复至40/200；病例二：男，23岁，车祸至头部外伤三小时入院，GCS8(E1V2M5)，右侧瞳孔散大，直接对光反射消失，间接对光反射存在。眼眶CT右侧视神经管、眶上裂未见骨折，考虑视神经水肿。全麻下行以伤口为手术切口，经眶上锁孔入路行视神经管减压术。患眼术后第一天即出现微弱的直接对光反射，2周后恢复至正常；病例三：男，22岁，车祸至头部外伤3天，由外院转入院，查体GCS13（E3V4M6），左侧瞳孔5mm，直接光反射消失，直接光反射消失、间接光感反射灵敏。眼眶CT（平扫+三维重建）提示左侧视神经管骨折，管腔扩大，视神经无明显压迫。保守治疗，静脉予以大剂量激素冲击+神经营养药，三天后激素逐渐减量，后改口服维持2周。1月后患眼视力逐渐恢复至正常；病例四：女，48岁，车祸至头部外伤1月，入院查体GCS15分，双眼无光感，瞳孔扩大，左眼直径约4mm，右眼瞳孔直径约3.5mm，直接间接光反射均消失。眼眶CT（平扫）提示双侧眼视神经管完整，无骨折片压迫视神经。双侧眶上锁孔入路视神经减压术视神经管减压手术，视神经管手术减压充分，伤口愈合良好，无明显疤痕；锁孔骨瓣复位满意。一月双眼可有光感。结论：影像学不应作为视神经管减压手术的唯一标准；不同患者根据具体情况采取不同的手术入路；双手使用高速磨钻，视神经管全程减压，宽度范围不应小于视神经管直径的2/5。